| Matériels et Méthodes
35
b.
Analyse automatique des sels nutritifs
Les réactifs, les solutions étalons, et les protocoles de dosage pour chaque élément nutritif
sont réalisés selon les protocoles décrits par (Aminot et al.,1983).
Principe de dosage des Nitrates et Nitrites (NO - 3 et NO - 2)
La méthode est basée sur la réduction des nitrates en nitrites par passage de l’échantillon
sur une colonne de cadmium traité au cuivre (Wood et al. 1967, in Aminot et Kérouel, 2004).
Après cette réduction les nitrites sont dosés selon les conditions réactionnelles décrites par
Bendshneider et Robinson (1952)(in Aminot et Kérouel 2004). Cette méthode automatisée
s'applique à des concentrations allant de 1 à 100 ppb de N. En effet, les nitrites forment un
diazoïque par réaction avec la sulfanilamide en milieu acide (pH < 2). Ce composé formera
ensuite, en présence de N-naphtylethylene diamine, un composé azoïque de couleur rosée
absorbant un maximum de lumière à 540 nm (SKALAR®,1998).
Principe du dosage des Orthophosphates (PO4 3- )
Sa méthode d’analyse est la colorimétrie du bleu phosphomolybdique, qui est basée sur
la réaction de Deniges selon la méthode de Murphy & Reily (1962)(in Aminot et Kérouel,
2004).
Le molybdate d'ammonium et le tartrate d'antimoine de potassium réagissent à une
température de 40°C dans un milieu acide avec les solutions diluées du phosphate pour former
un composé d'antimoine-phospho-molybdate. Ce composé est réduit à un composé intensément
bleu-coloré par l'acide ascorbique à un maximum d’absorption à 880nm.
Principe du dosage des silicates (SiO - 2)
Le dosage de l'acide orthosilicique dans l'eau de mer est basé sur la méthode de Mulin et
Reily (l955). Cette méthode a été adaptée à l'analyse automatisée et nous avons utilisé la
technique du constructeur SKALAR. Cette dernière repose sur la formation de l'acide
silicomolybdique, non affectée par la salinité proposée par Smith et Milne (1981) (in Aminot
et Kérouel, 2004). Sa mesure est basée sur la formation d’un complexe silicomolybdique par
la réaction des silicates avec le molybdates d’ammonium en milieuacide. Ce complexe sera par
la suite réduit par l’acide ascorbique en donnant naissance à un compose colore en bleu
absorbant à 810nm. L’acide oxalique et ajouté pour évite les interférences des phosphates.
35
b.
Analyse automatique des sels nutritifs
Les réactifs, les solutions étalons, et les protocoles de dosage pour chaque élément nutritif
sont réalisés selon les protocoles décrits par (Aminot et al.,1983).
Principe de dosage des Nitrates et Nitrites (NO - 3 et NO - 2)
La méthode est basée sur la réduction des nitrates en nitrites par passage de l’échantillon
sur une colonne de cadmium traité au cuivre (Wood et al. 1967, in Aminot et Kérouel, 2004).
Après cette réduction les nitrites sont dosés selon les conditions réactionnelles décrites par
Bendshneider et Robinson (1952)(in Aminot et Kérouel 2004). Cette méthode automatisée
s'applique à des concentrations allant de 1 à 100 ppb de N. En effet, les nitrites forment un
diazoïque par réaction avec la sulfanilamide en milieu acide (pH < 2). Ce composé formera
ensuite, en présence de N-naphtylethylene diamine, un composé azoïque de couleur rosée
absorbant un maximum de lumière à 540 nm (SKALAR®,1998).
Principe du dosage des Orthophosphates (PO4 3- )
Sa méthode d’analyse est la colorimétrie du bleu phosphomolybdique, qui est basée sur
la réaction de Deniges selon la méthode de Murphy & Reily (1962)(in Aminot et Kérouel,
2004).
Le molybdate d'ammonium et le tartrate d'antimoine de potassium réagissent à une
température de 40°C dans un milieu acide avec les solutions diluées du phosphate pour former
un composé d'antimoine-phospho-molybdate. Ce composé est réduit à un composé intensément
bleu-coloré par l'acide ascorbique à un maximum d’absorption à 880nm.
Principe du dosage des silicates (SiO - 2)
Le dosage de l'acide orthosilicique dans l'eau de mer est basé sur la méthode de Mulin et
Reily (l955). Cette méthode a été adaptée à l'analyse automatisée et nous avons utilisé la
technique du constructeur SKALAR. Cette dernière repose sur la formation de l'acide
silicomolybdique, non affectée par la salinité proposée par Smith et Milne (1981) (in Aminot
et Kérouel, 2004). Sa mesure est basée sur la formation d’un complexe silicomolybdique par
la réaction des silicates avec le molybdates d’ammonium en milieuacide. Ce complexe sera par
la suite réduit par l’acide ascorbique en donnant naissance à un compose colore en bleu
absorbant à 810nm. L’acide oxalique et ajouté pour évite les interférences des phosphates.