CHAPITRE III
MATERIELS ET METHODES
39
Mode opératoire
Stériliser les supports filtres et les entonnoirs de la rompe de filtration avec un peu
d’alcool, puis les flambes.
Verser une quantité d’eau distillée stérile dans le dispositif de filtration et faire le vide.
Mettre en place la rompe de filtration.
Poser stérilement le filtre sur le support filtre à l’aide d’une pince stérile.
Filtrer un volume d’échantillon (100ml) bien homogénéisé.
Déposer les filtres sur un milieu de culture adapté aux bactéries recherchées.
Etiqueter les boites de pétri (le numéro de la station, la date, le nom de la bactérie…).
Incuber les boites à la température appropriée
Remarque : la composition des milieux cultures utilisés dans cette analyse est indiquée en
ANNEXE III.
2.5.1.1 Dénombrement des coliformes totaux et coliformes fécaux
Après avoir déposé le filtre sur une gélose lactosée au TTC et au tergitol 7, et l’incubé
à 37 °C pour les coliformes totaux et à 44 °C pour les coliformes fécaux. Le dénombrement
concerne les colonies qui sont entourées d’un halo jaune (utilisation du lactose) et celles
colorées en rouge par forte réduction du TTC (JOFFIN et JOFFIN, 2010).
Le nombre de colonie s’exprime en Unité Formant Colonie dans un volume
d’échantillon d’eau analysé de 100 ml (UFC/100ml).
Vue la charge d’eau en mes, on a procédé à des dilutions jusqu’à 10
-2 pour les analyses
microbiologique afin d’obtenir un résultat dénombrable.
Figure III.18: L'autoclave.
Figure III.17: L’incubateur.
MATERIELS ET METHODES
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Mode opératoire
Stériliser les supports filtres et les entonnoirs de la rompe de filtration avec un peu
d’alcool, puis les flambes.
Verser une quantité d’eau distillée stérile dans le dispositif de filtration et faire le vide.
Mettre en place la rompe de filtration.
Poser stérilement le filtre sur le support filtre à l’aide d’une pince stérile.
Filtrer un volume d’échantillon (100ml) bien homogénéisé.
Déposer les filtres sur un milieu de culture adapté aux bactéries recherchées.
Etiqueter les boites de pétri (le numéro de la station, la date, le nom de la bactérie…).
Incuber les boites à la température appropriée
Remarque : la composition des milieux cultures utilisés dans cette analyse est indiquée en
ANNEXE III.
2.5.1.1 Dénombrement des coliformes totaux et coliformes fécaux
Après avoir déposé le filtre sur une gélose lactosée au TTC et au tergitol 7, et l’incubé
à 37 °C pour les coliformes totaux et à 44 °C pour les coliformes fécaux. Le dénombrement
concerne les colonies qui sont entourées d’un halo jaune (utilisation du lactose) et celles
colorées en rouge par forte réduction du TTC (JOFFIN et JOFFIN, 2010).
Le nombre de colonie s’exprime en Unité Formant Colonie dans un volume
d’échantillon d’eau analysé de 100 ml (UFC/100ml).
Vue la charge d’eau en mes, on a procédé à des dilutions jusqu’à 10
-2 pour les analyses
microbiologique afin d’obtenir un résultat dénombrable.
Figure III.18: L'autoclave.
Figure III.17: L’incubateur.