CHAPITRE III
MATERIELS ET METHODES
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 Le composé diazoïque se combine en milieu acide avec le dihydrochlorure de N-(1naphthyl)-éthylènediamine (NED) pour former un composé rosé dont l’absorbance à
543 nm est proportionnelle à la concentration des ions nitrite.
2.3.2.2 Les réactifs exigés
 Réactif 1 : Solution de Sulfanilamide.
 Réactif 2 : Solution de N-Naphtyl-éthylène diamine.
 Solution étalon primaire de nitrite.
 Solution étalon secondaire de nitrite.
Remarque : la préparation des réactifs est décrite en ANNEXE II.
2.3.2.3 Etalonnage
 Introduire dans des fioles jaugées de 500 ml de 1- 2- 5- 10- 20- 50- 100- 250 ml la
solution secondaire de nitrite et compléter avec de l’eau de mer afin d’obtenir la
gamme de concentration de 0.1- 0.2- 0.5-1- 2 – 5- 10- 25 µmol/l.
 Analyser à 543 nm les différentes solutions, ainsi que le blanc de réactif et aussi le
blanc de l’échantillon.
La courbe d’étalonnage établit (Figure III. 12) a pour l’équation : y = 0.042x.
Figure III.12: La courbe d’étalonnage de nitrite.
2.3.2.4 Mode opératoire
 50 ml ± 1 ml d’échantillon.
 1 ml de réactif 1 et mélanger.
 Laisser reposer 2 à 8 min.
 1 ml de réactif 2 et mélanger.
 Attendre au moins 10 min et au plus de 1 heure.
y = 0,042x
R² = 0,9959
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1,2
0
5
10
15
20
25
30
Abs
[NO2-] µmol/l