Chapitre II : Matériel et méthode.
34
La recherche de l’oxydase est un test fondamental pour l’identification des bacilles à Gram
négatif.
II.4.2.2 Mode opératoire
- Ce test est réalisé à l’aide de disque d’oxydase prêt à l’emploi :
- Déposer un disque imprégné de réactif sur une lame, l’imbiber avec une goutte d’eau
distillée stérile.
- Prélever une colonie parfaitement isolée avec une anse de platine et la frotter sur le
disque pendant une dizaine de secondes.
- Observer immédiatement.
Figure II.6 : Présentation des différents résultats de test oxydase.
II.4.3 Coloration de Gram
Cette technique doit son nom au bactériologiste danois Hans Christian Gram qui a mis au
point son protocole en 1884.
C’est une coloration qui permet de mettre en évidence les propriétés de la paroi bactérienne,
et d’utiliser ces propriétés pour la distinction entre deux groupes bactériens, les Gram +,
dotées d’une simple paroi avec une grande quantité de peptidoglycane et les Gram -,
-Pas d’apparition de tache
violette =>la bactérie est
oxydase.
- Apparition d’une tache
violette
=>la
bactérie
est oxydase+ (le cytochrome
oxydase).