CHAPITRE 2
Matériels & méthodes
37
étiquetés. Pour ce qui est des oursins, c’est les gonades femelles GF qui sont récupérées à l’aide
d’un scalpel dans des piluliers étiquetés, car ils (GF) accumulent beaucoup plus de métaux traces
que les gonades malles (DERMECH, 2010). Pour le sédiment, il est mis dans des piluliers
étiquetés, en effet les échantillons sont près pour les traitements suivants :
Lyophilisation : c’est une technique qui permet la déshydratation de l’échantillon congelé
par sublimation (c’est-à-dire le passage de l’eau de l’état solide à l’état vapeur) et cela à
basse température -56°C et sous vide (0.1bar) pendant 48h pour le sédiment et 3j pour le
biote (est plus fragile et contient beaucoup d’eau, ça prend du temps pour sécher). La
lyophilisation est préférable au séchage à l’étuve, car cette dernière entraine la perte des
métaux volatils comme le mercure.Les échantillons sont pesés directement dans des
piluliers avant et après la lyophilisation et leurs poids sec est noté PS.Ils sont ensuite
conservés et fermés hermétiquement jusqu’au traitement suivant.
Broyage : une fois les échantillons déshydratés :
Biote : il est broyé soit avec un mixeur ou un mortier en agate.
Sédiment : il est broyé à l’aide d’un mortier en porcelaine, afin de disperser les grains
ensuite il est récupéré dans des piluliers stérilisé.
Homogénéisation : s’est déroulée pendant 48h a lieu dans le but d’uniformiser la
réparation des particules (surtout les particules sédimentaires).L’échantillon est bien
conservé soit dans un dessiccateur ou dans une étuve à 37°C, jusqu’à la minéralisation.
2.1.3.2. Minéralisation
La minéralisation est une opération d’extraction et de solubilisation des éléments à analyser et de
les rendre à l’état ionique le plus oxydé, elle sert aussi à éliminer toute la matière organique.
La digestion pour le plomb et le cadmium et le zinc, est faite comme suit :
1) Homogénéisation de l’échantillon (2min) ;
2) Pesée 0.5g d’échantillon (biote ou sédiment) sec dans les bombes en téflon (50ml) ;
3) Pour le sédiment : ajout de 6ml d’eau régale (4.5 ml HCL : 1.5ml HNO3, 3:1 v/v)
dans chaque godet
Pour le biote : ajout de 5ml d’HNO3 dans chaque godet
4) Fermeture hermétique des bombes et mise à température ambiante toute une nuit ;
5) Chauffage des bombes sur plaque chauffante et bloc d’aluminium pendant :
2h30 à 120°C pour le sédiment.
3h à 90°C pour le biote.
Matériels & méthodes
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étiquetés. Pour ce qui est des oursins, c’est les gonades femelles GF qui sont récupérées à l’aide
d’un scalpel dans des piluliers étiquetés, car ils (GF) accumulent beaucoup plus de métaux traces
que les gonades malles (DERMECH, 2010). Pour le sédiment, il est mis dans des piluliers
étiquetés, en effet les échantillons sont près pour les traitements suivants :
Lyophilisation : c’est une technique qui permet la déshydratation de l’échantillon congelé
par sublimation (c’est-à-dire le passage de l’eau de l’état solide à l’état vapeur) et cela à
basse température -56°C et sous vide (0.1bar) pendant 48h pour le sédiment et 3j pour le
biote (est plus fragile et contient beaucoup d’eau, ça prend du temps pour sécher). La
lyophilisation est préférable au séchage à l’étuve, car cette dernière entraine la perte des
métaux volatils comme le mercure.Les échantillons sont pesés directement dans des
piluliers avant et après la lyophilisation et leurs poids sec est noté PS.Ils sont ensuite
conservés et fermés hermétiquement jusqu’au traitement suivant.
Broyage : une fois les échantillons déshydratés :
Biote : il est broyé soit avec un mixeur ou un mortier en agate.
Sédiment : il est broyé à l’aide d’un mortier en porcelaine, afin de disperser les grains
ensuite il est récupéré dans des piluliers stérilisé.
Homogénéisation : s’est déroulée pendant 48h a lieu dans le but d’uniformiser la
réparation des particules (surtout les particules sédimentaires).L’échantillon est bien
conservé soit dans un dessiccateur ou dans une étuve à 37°C, jusqu’à la minéralisation.
2.1.3.2. Minéralisation
La minéralisation est une opération d’extraction et de solubilisation des éléments à analyser et de
les rendre à l’état ionique le plus oxydé, elle sert aussi à éliminer toute la matière organique.
La digestion pour le plomb et le cadmium et le zinc, est faite comme suit :
1) Homogénéisation de l’échantillon (2min) ;
2) Pesée 0.5g d’échantillon (biote ou sédiment) sec dans les bombes en téflon (50ml) ;
3) Pour le sédiment : ajout de 6ml d’eau régale (4.5 ml HCL : 1.5ml HNO3, 3:1 v/v)
dans chaque godet
Pour le biote : ajout de 5ml d’HNO3 dans chaque godet
4) Fermeture hermétique des bombes et mise à température ambiante toute une nuit ;
5) Chauffage des bombes sur plaque chauffante et bloc d’aluminium pendant :
2h30 à 120°C pour le sédiment.
3h à 90°C pour le biote.