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Annexe 2
Les éléments nutritifs
Dosage des nitrites :
Le dosage des nitrites (
) est réalisé selon la méthode de GRIESS, réaction de diazotation
spécifique de l'acide nitreux, qui s’effectue en deux étapes :
Etape 1 : L’ion nitrite réagit avec le sulfanilamide (4-H2NC6H4SO2NH2) pour former un
composé diazoïque (sel de diazonium).
Etape 2 : le composé diazoïque se combine ensuite en milieu acide (pH<2) avec le NED
pour former un composé rosé dont l’absorbance à 540nm (BENSCHNEIDER et
ROBINSON, 1952 ; LOURGUIOUI, 2006) est proportionnelle à la concentration des
ions nitrite.
Dosage des nitrates :
La détermination des nitrates se fait indirectement. Il y a d’abord passage des échantillons dans
une colonne de cadmium traité au cuivre pour la réduction des nitrates (
) en nitrites (
)
(WOOD et al., 1967 in LOURGUIOUI, 2006). Ces dernières (
initiaux +
réduits)
seront ensuite dosées par colorimétrie selon la méthode décrite plus haut. Les concentrations de
nitrates sont obtenues après la soustraction des concentrations de nitrites déterminés,
antérieurement, avant le passage des échantillons dans la colonne réductrice D’après RODIER
et al., (1996).
Dosage des orthophosphates :
Dans un premier temps, en milieu acide l’ion orthophosphate (
) réagit avec l’ion molybdate
d'ammonium et l’ion oxydrate de potassium (Antimoine), il en résulte la formation de l’acide
phosphomolybdique. Ensuite, Ce dernier est réduit par l’acide ascorbique en bleu de molybdène
dont l'absorbance à 880nm est proportionnelle à la concentration de l’ion orthophosphate présent
dans un échantillon (MURPHY et RILEY, 1962 in LOURGUIOUI 2006).
Dosage du silicium dissout :
Il se présente à 95 % sous forme d’acide orthosilicique Si(OH)4 (AMINOT et
CHAUSSEPIED, 1983) en milieu acide, le silicium dissous réagit avec le molybdate d’ammonium
afin de donner un complexe silicomolybdique qui sera ensuite réduit par l’acide ascorbique, donne
à la fin un composé coloré en bleu, absorbant à 810 nm (MULLIN et RILEY,1955 in
LOURGUIOUI, 2006). L’ajout de l’acide oxalique évite l’interférence des phosphates.
Réactifs : les réactifs 1, 2 et 3 utilisés sont acheté chez le fabricant, ils contiennent les
proportions suivantes de réactifs.
Nitrites
Phosphates
Silicates
R1
Phosphoric acid
9%
Acide
sulfurique
16,5%
Molybdate
d’ammonium
Sulfanilamide
≤ 1%
Antimoine
≤ 1%
Acide
sulfurique
NED
≤ 0,1%
Molybdate
d’ammonium
≤ 1%
Annexe 2
Les éléments nutritifs
Dosage des nitrites :
Le dosage des nitrites (
) est réalisé selon la méthode de GRIESS, réaction de diazotation
spécifique de l'acide nitreux, qui s’effectue en deux étapes :
Etape 1 : L’ion nitrite réagit avec le sulfanilamide (4-H2NC6H4SO2NH2) pour former un
composé diazoïque (sel de diazonium).
Etape 2 : le composé diazoïque se combine ensuite en milieu acide (pH<2) avec le NED
pour former un composé rosé dont l’absorbance à 540nm (BENSCHNEIDER et
ROBINSON, 1952 ; LOURGUIOUI, 2006) est proportionnelle à la concentration des
ions nitrite.
Dosage des nitrates :
La détermination des nitrates se fait indirectement. Il y a d’abord passage des échantillons dans
une colonne de cadmium traité au cuivre pour la réduction des nitrates (
) en nitrites (
)
(WOOD et al., 1967 in LOURGUIOUI, 2006). Ces dernières (
initiaux +
réduits)
seront ensuite dosées par colorimétrie selon la méthode décrite plus haut. Les concentrations de
nitrates sont obtenues après la soustraction des concentrations de nitrites déterminés,
antérieurement, avant le passage des échantillons dans la colonne réductrice D’après RODIER
et al., (1996).
Dosage des orthophosphates :
Dans un premier temps, en milieu acide l’ion orthophosphate (
) réagit avec l’ion molybdate
d'ammonium et l’ion oxydrate de potassium (Antimoine), il en résulte la formation de l’acide
phosphomolybdique. Ensuite, Ce dernier est réduit par l’acide ascorbique en bleu de molybdène
dont l'absorbance à 880nm est proportionnelle à la concentration de l’ion orthophosphate présent
dans un échantillon (MURPHY et RILEY, 1962 in LOURGUIOUI 2006).
Dosage du silicium dissout :
Il se présente à 95 % sous forme d’acide orthosilicique Si(OH)4 (AMINOT et
CHAUSSEPIED, 1983) en milieu acide, le silicium dissous réagit avec le molybdate d’ammonium
afin de donner un complexe silicomolybdique qui sera ensuite réduit par l’acide ascorbique, donne
à la fin un composé coloré en bleu, absorbant à 810 nm (MULLIN et RILEY,1955 in
LOURGUIOUI, 2006). L’ajout de l’acide oxalique évite l’interférence des phosphates.
Réactifs : les réactifs 1, 2 et 3 utilisés sont acheté chez le fabricant, ils contiennent les
proportions suivantes de réactifs.
Nitrites
Phosphates
Silicates
R1
Phosphoric acid
9%
Acide
sulfurique
16,5%
Molybdate
d’ammonium
Sulfanilamide
≤ 1%
Antimoine
≤ 1%
Acide
sulfurique
NED
≤ 0,1%
Molybdate
d’ammonium
≤ 1%