Chapitre II
MATERIEL ET METHODES
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4.5.2 Recherche des Vibrions
 Principe
L’enrichissement des vibrions est effectué sur milieu hypersalé Eau Peptonée Alcaline (EPA) 10
fois concentrée et l’isolement est réalisé sur gélose TCBS (Thiosulfate-Citrate-Bile-Saccharose).
(figure II.9).
Les colonies suspectes isolées, font l’objet d’une identification par la coloration de Gram, test de
la catalase, test de l’oxydase et tests biochimiques à l’aide de la galerie API 20 E.
 Mode opératoire
 Enrichissement
Dans un flacon de 500ml :
- Mettre 50 mldu milieu d'enrichissement EPA 10X;
- Compléter avec 450ml d'eau de mer à analyser ;
- Incuber à 37 °C pendant 18 à 24heures.
 Isolement
A partir de l’enrichissement, on fait un isolement sur gélose TCBS qui sera incubée à 37°C
pendant 18 à 24heures.
 Lecture sur TCBS
Les colonies sont jaunes quand le milieu change de couleur (réduction du saccharose)
et sont vertes quand il garde sa coloration initiale (vert).