Chapitre 3 : Matériels et méthodes
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V.1.2. Etalonnage
Cette opération nécessite la préparation pour chacun des éléments à analyser, une solution
mère et une solution intermédiaire. Pour chacune de ces solutions filles, on réalise une série
de six (06 étalons couvrant la gamme de la concentration des échantillons rencontrés
habituellement dans l’eau de mer.
Les droites d’étalonnage sont établies automatiquement par le logiciel en utilisant les
concentrations connus des solutions étalons et leurs hauteurs de pic correspondantes. L’eau
bi-distillée et les réactifs sont pris comme référence pour la construction de la ligne de base.
V.1.3. Principe de dosage des Nitrates et Nitrites (NO3‾et NO2‾)
La méthode est basée sur la réduction des nitrates en nitrites par passage de l’échantillon sur
une colonne réductrice de cadmium traité au cuivre (Wood et al, 1967, in Aminot et
Kérouel, 2004).
Après cette réduction les nitrites sont dosés selon les conditions réactionnelles décrites par
(Bendshneider et Robinson 1952 ; in Aminot et Kérouel, 2004).
Cette méthode automatisée s'applique à des concentrations allant de 1 à 100 ppb N. En effet,
les nitrites forment un diazoïque par réaction avec la sulfanilamide en milieu acide (pH < 2).
Ce composé formera ensuite, en présence de N-naphtylethylenedi-amine, un composé azoïque
de couleur rose absorbant un maximum de lumière à 540 nm (SKALAR®,1998).
a) - Préparation des réactifs et des standards (voir annexe 2).
b) - Activation de la colonne réductrice de Cadmium (voir annexe 2).
d)- Etalonnage
Une série de six standards est préparée à chaque analyse (quotidiennement). La courbe
d'étalonnage établie est une droite d’équation :
Pour les Nitrates :
Y = 44.878 x
R² = 1
Figure 3.6 : Courbe d’étalonnage de nitrate.
y = 44.87x
R² = 1
0
10
20
30
40
50
60
0,0000
0,5000
1,0000
1,5000
Hauteur
de
pic
[NO3‾]µmol/l
Série1
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V.1.2. Etalonnage
Cette opération nécessite la préparation pour chacun des éléments à analyser, une solution
mère et une solution intermédiaire. Pour chacune de ces solutions filles, on réalise une série
de six (06 étalons couvrant la gamme de la concentration des échantillons rencontrés
habituellement dans l’eau de mer.
Les droites d’étalonnage sont établies automatiquement par le logiciel en utilisant les
concentrations connus des solutions étalons et leurs hauteurs de pic correspondantes. L’eau
bi-distillée et les réactifs sont pris comme référence pour la construction de la ligne de base.
V.1.3. Principe de dosage des Nitrates et Nitrites (NO3‾et NO2‾)
La méthode est basée sur la réduction des nitrates en nitrites par passage de l’échantillon sur
une colonne réductrice de cadmium traité au cuivre (Wood et al, 1967, in Aminot et
Kérouel, 2004).
Après cette réduction les nitrites sont dosés selon les conditions réactionnelles décrites par
(Bendshneider et Robinson 1952 ; in Aminot et Kérouel, 2004).
Cette méthode automatisée s'applique à des concentrations allant de 1 à 100 ppb N. En effet,
les nitrites forment un diazoïque par réaction avec la sulfanilamide en milieu acide (pH < 2).
Ce composé formera ensuite, en présence de N-naphtylethylenedi-amine, un composé azoïque
de couleur rose absorbant un maximum de lumière à 540 nm (SKALAR®,1998).
a) - Préparation des réactifs et des standards (voir annexe 2).
b) - Activation de la colonne réductrice de Cadmium (voir annexe 2).
d)- Etalonnage
Une série de six standards est préparée à chaque analyse (quotidiennement). La courbe
d'étalonnage établie est une droite d’équation :
Pour les Nitrates :
Y = 44.878 x
R² = 1
Figure 3.6 : Courbe d’étalonnage de nitrate.
y = 44.87x
R² = 1
0
10
20
30
40
50
60
0,0000
0,5000
1,0000
1,5000
Hauteur
de
pic
[NO3‾]µmol/l
Série1