Matériels et méthodes
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- Microscope inversé de type OPTIKA B 500 équipés d’oculaires de 15X et d’objectifs
de 10, 20, 40 et 60X.
- Tubes de sédimentation pour chambre d’Utermöhl (50et 100 ml).
- Appareil photo numérique.
II -4-2 Méthodes utilisées :
II -4-3 Analyse des échantillons au laboratoire :
Le comptage des cellules a été réalisé sous microscope inversé de type OPTIKA B
500 (figure 11c) selon la méthode Utermöhl (1958) ; cette méthode est basée sur la
décantation du phytoplancton via une colonne à sédimentation, d’un échantillon de
volume connu.
II -4-3-1 La présentation des étapes de la méthode Utermöhl (1958) :
Avant de commencer la préparation de la chambre il faut :
- Les chambres de sédimentation doivent être nettoyées et séchées entre deux
utilisations.
- Elles sont rincées à l’eau distillée.
- Les chambres sont ensuite laissées à sécher. Il est fait de même pour les lames de
verre rondes et carrées.
Homogénéisation de l’échantillon :
- agiter le flacon contenant l’échantillon à traiter manuellement
Préparation du sous-échantillon à faire sédimenter :
- Après l’homogénéisation de l’échantillon, un volume connu est versé en une seule
fois dans la chambre de sédimentation.
- On a choisi un volume de 100 ml de la colonne de sédimentation en rapport avec la
concentration en particules de l’échantillon.
- La chambre de sédimentation doit poser sur une surface plane sans vibrations (sur la
paillasse du laboratoire).
- Dans le cas de milieux fortement concentrés en particules, il peut être effectué des
dilutions. Pour cela, une pipette avec embouts amovibles peut être utilisée (pipette de
volume 1 ml). Un volume connu de l’échantillon est alors introduit dans une chambre
de sédimentation de 10 ml. Il est ensuite ajouté de l’eau distillée pour compléter à 10
ml avec une pissette d’eau distillée.
- Le volume de sous-échantillon sédimenté doit être repris sur le cahier de comptage.
- Après le remplissage de la chambre de sédimentation, une lame de verre ronde est
mise au sommet de la chambre de sédimentation, pour éviter de piéger des bulles
d’air.
- Le temps de sédimentation dans les cuves à décantation est variable, une durée de 24,
18 heures ou moins. Pour notre étude on a fait la sédimentation pendent 24 h.
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- Microscope inversé de type OPTIKA B 500 équipés d’oculaires de 15X et d’objectifs
de 10, 20, 40 et 60X.
- Tubes de sédimentation pour chambre d’Utermöhl (50et 100 ml).
- Appareil photo numérique.
II -4-2 Méthodes utilisées :
II -4-3 Analyse des échantillons au laboratoire :
Le comptage des cellules a été réalisé sous microscope inversé de type OPTIKA B
500 (figure 11c) selon la méthode Utermöhl (1958) ; cette méthode est basée sur la
décantation du phytoplancton via une colonne à sédimentation, d’un échantillon de
volume connu.
II -4-3-1 La présentation des étapes de la méthode Utermöhl (1958) :
Avant de commencer la préparation de la chambre il faut :
- Les chambres de sédimentation doivent être nettoyées et séchées entre deux
utilisations.
- Elles sont rincées à l’eau distillée.
- Les chambres sont ensuite laissées à sécher. Il est fait de même pour les lames de
verre rondes et carrées.
Homogénéisation de l’échantillon :
- agiter le flacon contenant l’échantillon à traiter manuellement
Préparation du sous-échantillon à faire sédimenter :
- Après l’homogénéisation de l’échantillon, un volume connu est versé en une seule
fois dans la chambre de sédimentation.
- On a choisi un volume de 100 ml de la colonne de sédimentation en rapport avec la
concentration en particules de l’échantillon.
- La chambre de sédimentation doit poser sur une surface plane sans vibrations (sur la
paillasse du laboratoire).
- Dans le cas de milieux fortement concentrés en particules, il peut être effectué des
dilutions. Pour cela, une pipette avec embouts amovibles peut être utilisée (pipette de
volume 1 ml). Un volume connu de l’échantillon est alors introduit dans une chambre
de sédimentation de 10 ml. Il est ensuite ajouté de l’eau distillée pour compléter à 10
ml avec une pissette d’eau distillée.
- Le volume de sous-échantillon sédimenté doit être repris sur le cahier de comptage.
- Après le remplissage de la chambre de sédimentation, une lame de verre ronde est
mise au sommet de la chambre de sédimentation, pour éviter de piéger des bulles
d’air.
- Le temps de sédimentation dans les cuves à décantation est variable, une durée de 24,
18 heures ou moins. Pour notre étude on a fait la sédimentation pendent 24 h.