MATÉRIELS ET MÉTHODES
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Figure 13 Droite d'étalonnage de la chlorophylle-a
A partir de cette droite d’étalonnage en déduit la constante de calibration Kx = 1/Kc , et le
rapport (Fo/Fa)max qui est la moyenne des rapports (Fo/Fa) pour chaque dilutions
3.6.7.4 Calcul de la concentration en chlorophylle-a des échantillons
Selon Holm-Hansen (1965) et Lorenzen (1967)
[í µí°¶ℎí µí±í µí±] = í µí°¾í µí±¥ × (í µí°¹ 0 − í µí°¹ í µí± ) í µí±í µí±í µí±¥ × (
í µí°¹ 0 −í µí°¹ í µí±
(í µí°¹ 0 í µí°¹ í µí±
⁄ ) í µí±í µí°´í µí± −1
) × [í µí± í µí±í µí±¥í µí±¡ /í µí± í µí±í µí±í µí±í µí±¡í µí±é ] 31
[í µí±ℎí µí±í µí±] = í µí°¾í µí±¥ × (í µí°¹ 0 − í µí°¹ í µí± ) í µí±í µí±í µí±¥ × í µí°¹ í µí± × (
1−((
í µí°¹ 0
í µí°¹ í µí±
)−1)
(í µí°¹ 0 í µí°¹ í µí±
⁄ ) í µí±í µí°´í µí± −1
) × [í µí± í µí±í µí±¥í µí±¡ /í µí± í µí±í µí±í µí±í µí±¡í µí±é ] 32
[Chla] : Concentration en chlorophylle active, (µg/L)
[Pheo] : Concentration en phéopigment, (µg/L)
Fo : Fluorescence de l’échantillon avant acidification
Fa : Fluorescence de l’échantillon après acidification
Vext : Volume de l’extrait, (L)
Vfiltré : Volume de l’eau de mer filtré, (L)
(Fo/Fa)max : Rapport d’acidification de la chl a pure de l’appareil de mesure (cf. étalonnage du
fluorimètre)
Kx : Constante de calibration du fluorimètre
3.6.7.5 Evaluation de la méthode
Pour estimer l’incertitude de la méthode on a fait trois (3) essais avec différentes méthodes sur
un échantillon d’eau de mer
• Test extraction avec acétone avec broyage et centrifugation (test 1)
• Test extraction avec acétone sans broyage et avec centrifugation (test 2)
• Test extraction avec acétone seulement (test3)
y = 2,8555x
R² = 0,9913
-2
0
2
4
6
8
10
12
14
0
1
2
3
4
5
fluoréscence
concentration(µg/l)
droite d'étalonnage
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Figure 13 Droite d'étalonnage de la chlorophylle-a
A partir de cette droite d’étalonnage en déduit la constante de calibration Kx = 1/Kc , et le
rapport (Fo/Fa)max qui est la moyenne des rapports (Fo/Fa) pour chaque dilutions
3.6.7.4 Calcul de la concentration en chlorophylle-a des échantillons
Selon Holm-Hansen (1965) et Lorenzen (1967)
[í µí°¶ℎí µí±í µí±] = í µí°¾í µí±¥ × (í µí°¹ 0 − í µí°¹ í µí± ) í µí±í µí±í µí±¥ × (
í µí°¹ 0 −í µí°¹ í µí±
(í µí°¹ 0 í µí°¹ í µí±
⁄ ) í µí±í µí°´í µí± −1
) × [í µí± í µí±í µí±¥í µí±¡ /í µí± í µí±í µí±í µí±í µí±¡í µí±é ] 31
[í µí±ℎí µí±í µí±] = í µí°¾í µí±¥ × (í µí°¹ 0 − í µí°¹ í µí± ) í µí±í µí±í µí±¥ × í µí°¹ í µí± × (
1−((
í µí°¹ 0
í µí°¹ í µí±
)−1)
(í µí°¹ 0 í µí°¹ í µí±
⁄ ) í µí±í µí°´í µí± −1
) × [í µí± í µí±í µí±¥í µí±¡ /í µí± í µí±í µí±í µí±í µí±¡í µí±é ] 32
[Chla] : Concentration en chlorophylle active, (µg/L)
[Pheo] : Concentration en phéopigment, (µg/L)
Fo : Fluorescence de l’échantillon avant acidification
Fa : Fluorescence de l’échantillon après acidification
Vext : Volume de l’extrait, (L)
Vfiltré : Volume de l’eau de mer filtré, (L)
(Fo/Fa)max : Rapport d’acidification de la chl a pure de l’appareil de mesure (cf. étalonnage du
fluorimètre)
Kx : Constante de calibration du fluorimètre
3.6.7.5 Evaluation de la méthode
Pour estimer l’incertitude de la méthode on a fait trois (3) essais avec différentes méthodes sur
un échantillon d’eau de mer
• Test extraction avec acétone avec broyage et centrifugation (test 1)
• Test extraction avec acétone sans broyage et avec centrifugation (test 2)
• Test extraction avec acétone seulement (test3)
y = 2,8555x
R² = 0,9913
-2
0
2
4
6
8
10
12
14
0
1
2
3
4
5
fluoréscence
concentration(µg/l)
droite d'étalonnage
