Chapitre II : Matériel et méthodes 2018
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II.2.2.3.1.Analyse des métaux lourds
a- Principe de la spectrophotométrie d’absorption atomique (SAA)
Le passage de la forme ionique (métal en solution) à la forme atomique se produit par une source thermique
(source d’atomisation). Les atomes ainsi formés passent d’un niveau énergétique fondamental (état initial) à
un niveau plus élevé (état excité) traversé par un faisceau de lumière à mesure et d’intensité incidente Io.
L’absorbance correspond à la différence entre l’intensité incidente (Io) et l’intensité transmise (I).Cette
différence (I-Io) est déterminée par un photomultiplicateur qui lui transforme cette intensité lumineuse en un
signal électrique quantifiable.
b- Loi de Beer – Lambert.
L'intensité de l'absorption dépend directement du nombre de particules absorbant la lumière selon la loi de
Beer-Lambert. D’après cette dernière, la densité optique d’une solution ou d’une substance absorbante dans
un solvant transparent est proportionnelle à l’épaisseur de la solution traversée et à la concentration des
substances absorbante de la solution (Audigie et al, 1985).
II.2.2.4.Analyse des hydrocarbures aliphatique et aromatique dans le sédiment
Apres avoir faire la sortis, les échantillons destiné a cette analyse sont congelés à -18 °C.
L’analyse des hydrocarbures dans les sédiments superficiels est réalisée selon les étapes suivantes :
Congélation ;
Lyophilisation : On place le sédiment au lyophilisateur à -50 °C pendant 72 h pour le sécher ;
Broyage : Les sédiments lyophilisés sont ensuite broyés en poudre fine à l’aide d’un mortier en
porcelaine, qui doit être conditionné entre chaque deux utilisation.
a- Extraction
On fait d’abord l’extraction à blanc pendant 4 heures avec l’hexane (échantillon d’inter calibration)
peser 5 g de sédiment et les mettre dans des cartouches en cellulose ;
Mettre les cartouches dans un extracteur Soxhlet pour extraire les hydrocarbures ;
Verser un mélange de 150 ml d’hexane et de déchlorométhane dans le ballon a colle rodé ;
Régler le chauffage à 90°C en premier temps, dès que le mélange commence à bouillir fixer
la température à 60°C ;
Laisser l’extraction se poursuivre pendant 8 h.
b- Concentration
La concentration de l’échantillon du sédiment se fait de la même façon comme l’échantillon de l’eau de mer,
mais tant que le sédiment est très riche en soufre, donc, avant la concentration avec sous jet d’azote
l’échantillon est traité au mercure : ajouter à l’échantillon quelque gouttes de mercure lesquelles au contact
du souffre noircissent, ces gouttes noires seront retirées et l’opération sera ainsi répéter jusqu’à ce que le
mercure ne change plus de couleur.
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II.2.2.3.1.Analyse des métaux lourds
a- Principe de la spectrophotométrie d’absorption atomique (SAA)
Le passage de la forme ionique (métal en solution) à la forme atomique se produit par une source thermique
(source d’atomisation). Les atomes ainsi formés passent d’un niveau énergétique fondamental (état initial) à
un niveau plus élevé (état excité) traversé par un faisceau de lumière à mesure et d’intensité incidente Io.
L’absorbance correspond à la différence entre l’intensité incidente (Io) et l’intensité transmise (I).Cette
différence (I-Io) est déterminée par un photomultiplicateur qui lui transforme cette intensité lumineuse en un
signal électrique quantifiable.
b- Loi de Beer – Lambert.
L'intensité de l'absorption dépend directement du nombre de particules absorbant la lumière selon la loi de
Beer-Lambert. D’après cette dernière, la densité optique d’une solution ou d’une substance absorbante dans
un solvant transparent est proportionnelle à l’épaisseur de la solution traversée et à la concentration des
substances absorbante de la solution (Audigie et al, 1985).
II.2.2.4.Analyse des hydrocarbures aliphatique et aromatique dans le sédiment
Apres avoir faire la sortis, les échantillons destiné a cette analyse sont congelés à -18 °C.
L’analyse des hydrocarbures dans les sédiments superficiels est réalisée selon les étapes suivantes :
Congélation ;
Lyophilisation : On place le sédiment au lyophilisateur à -50 °C pendant 72 h pour le sécher ;
Broyage : Les sédiments lyophilisés sont ensuite broyés en poudre fine à l’aide d’un mortier en
porcelaine, qui doit être conditionné entre chaque deux utilisation.
a- Extraction
On fait d’abord l’extraction à blanc pendant 4 heures avec l’hexane (échantillon d’inter calibration)
peser 5 g de sédiment et les mettre dans des cartouches en cellulose ;
Mettre les cartouches dans un extracteur Soxhlet pour extraire les hydrocarbures ;
Verser un mélange de 150 ml d’hexane et de déchlorométhane dans le ballon a colle rodé ;
Régler le chauffage à 90°C en premier temps, dès que le mélange commence à bouillir fixer
la température à 60°C ;
Laisser l’extraction se poursuivre pendant 8 h.
b- Concentration
La concentration de l’échantillon du sédiment se fait de la même façon comme l’échantillon de l’eau de mer,
mais tant que le sédiment est très riche en soufre, donc, avant la concentration avec sous jet d’azote
l’échantillon est traité au mercure : ajouter à l’échantillon quelque gouttes de mercure lesquelles au contact
du souffre noircissent, ces gouttes noires seront retirées et l’opération sera ainsi répéter jusqu’à ce que le
mercure ne change plus de couleur.