Annexes
Annexe 1
Milieu de culture
Principe
Un milieu de culture doit satisfaire à toutes les exigences nutritives des micro-organismes :
- Apport de la source d’énergie, de carbone et d’azote ;
- Besoins en ions minéraux, en facteurs de croissance ;
- pH et force ionique voisins de la valeur optimum ;
Il peut se présenter sous forme liquide ou solide, par addition d’agar ou gélose, de gélatine,
d’œuf entier coagulé ou de Gel de silice.
Procédure :
- Mesurer la masse nécessaire de poudre et d’éventuels additifs,
- Mettre les poudres en suspension dans un volume de diluant inférieur au volume
nécessaire,
- Chauffer pour dissoudre si nécessaire en agitant (à ébullition en général),
- Ajouter le complément de diluant,
- Ajuster le pH par addition de NaOH ou HCL à 0.1 mol.dm
-3
à l’aide d’un pH-mètre,
sauf si le fabricant indique le contraire,
- Conditionner, en prenant garde à la solidification d’un milieu contenant de l’agar et en
respectant les contraintes de volumes pour certains milieux,
- Stériliser, éventuellement à l’autoclave ou par filtration, assez rapidement après la
fabrication.