Chapitre II :
Matériel et Méthodes
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II.2.4. La chlorophylle a et pheopigment a
La chlorophylle a est le principal pigment photosynthétique des plantes, C’est pour
cette raison qu’elle est mesurée en tant qu’indicateur de la biomasse des micro-algues.
(Boudouma et Chenennou, 2007).
La chlorophylle a est donc un paramètre clé des études hydrologiques car il existe de
nombreux liens entre le développement du phytoplancton et les variations de la concentration
de plusieurs paramètres (oxygène, nutriment, pH, carbone organique particulaire) (Aminot et
Kerouel, 2004).
La chlorophylle a capture l’énergie lumineuse avec des maxima d’absorption entre 600
à 700nm.
Les phéopigments : sont des produits de dégradation des chlorophylles. Leur apparition
est favorisée par le broutage, l’activité bactérienne ou la sénescence des cellules algales.
Protocole de dosage
Principe de la méthode
La méthode consiste à :
• Filtrer un volume d’eau à travers un filtre. Le filtre sera ensuite immergé dans un
solvant (acétone à 90%), qui assura l’extraction des pigments
• Mesurer l’absorbance avant et après acidification de l’extrait (Aminot et
Chaussepied, 1983).
Appareillage et matériel utilisé
• Une pompe sous vide et un système de filtration ;
• Des filtres wattman 0,45µm ;
• Une centrifugeuse ;
• Un spectrophotomètre ;
• Des tubes en verre ;
Mode opératoire
• Filtrer 500mL d’eau de mer
• Après la filtration, mettre les filtres dans des tubes et ajouter 10mL d’acétone à 90%
• Déchiqueter les filtres ;
• Envelopper les tubes avec papier aluminium pour garder les filtres á l’abri de la
lumière,
• Mettre les tubes dans le réfrigérateur pendant 24h ;
• Mesurer les absorbances brutes des extraits non acidifiés selon la méthode de
LORENZEN à deux longueurs d’ondes : 665 et 750 µm ;
• Acidifier par addition d’acide chlorhydrique 2mol/L ;
• Mesurer les absorbances brutes des extraits acidifiés à 665µm puis à 750µm ;