Chapitre III
Matériel et méthodes
38
I.6.2.1. Extraction des hydrocarbures
C’est une extraction liquide-liquide réalisé avec l’hexane dans une ampoule à décanter de 2L.
Transvaser l’échantillon et son premier solvant d’extraction dans l’ampoule à décanter (2L) et
ajouter 50ml d’hexane.
Agiter manuellement pendant 20 minutes pour faciliter le contact entre le solvant d’extraction
et les hydrocarbures sans oublier d’ouvrir le bouchon de temps à autre afin de baisser la
pression.
Laisser décanter pendant 15minutes.
A l’aide d’une éprouvette graduée, récupérer la phase aqueuse qui se situe au dessous à cause
de sa densité la plus élevée que celle de la phase organique (phase supérieure).
Noter le volume d’eau extrait, V.
Recueillir la phase organique à l’aide d’un ballon.
Ajouter 2g de sulfate de sodium Na 2 SO 4 à l’extrait afin d’éliminer les traces d’eaux.
Puis fermer le avec un bouchon en verre.
Conserver l’échantillon à 4°C.
I.6.2.2. Concentration des extraits
C’est une étape particulièrement délicate du protocole expérimental. C’est au cours de celle-ci
que les pertes des hydrocarbures par évaporation sont les plus grandes. Sebbih (1991) montre
qu’au-delà de 200µl les pertes deviennent significatives. Le protocole de la Commission
Océanique Intergouvernementale COI, (1984) souligne bien ce risque et recommande de ne
pas dépasser cette limite qui est de 200µl (Sellali, 1997).
La concentration des extraits se fait en deux étapes :
1. Concentration avec l’évaporateur rotatifs jusqu’à un volume de 10ml environ. La
température de bain marie ne doit pas dépasser 69°C (la température d’ébullition de l’hexane
pour ne pas l’évaporer).
2. Concentration sous jet d’azote (N 2 ) jusqu’à un volume de 2ml.
I.6.2.3. Purification
Dans cette étape, on utilise une burette de 50ml de contenance, de 0,1ml de diamètre
interne et munie d’un robinet en téflon est remplie selon la méthode humide, successivement
par :
La laine de verre.
Matériel et méthodes
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I.6.2.1. Extraction des hydrocarbures
C’est une extraction liquide-liquide réalisé avec l’hexane dans une ampoule à décanter de 2L.
Transvaser l’échantillon et son premier solvant d’extraction dans l’ampoule à décanter (2L) et
ajouter 50ml d’hexane.
Agiter manuellement pendant 20 minutes pour faciliter le contact entre le solvant d’extraction
et les hydrocarbures sans oublier d’ouvrir le bouchon de temps à autre afin de baisser la
pression.
Laisser décanter pendant 15minutes.
A l’aide d’une éprouvette graduée, récupérer la phase aqueuse qui se situe au dessous à cause
de sa densité la plus élevée que celle de la phase organique (phase supérieure).
Noter le volume d’eau extrait, V.
Recueillir la phase organique à l’aide d’un ballon.
Ajouter 2g de sulfate de sodium Na 2 SO 4 à l’extrait afin d’éliminer les traces d’eaux.
Puis fermer le avec un bouchon en verre.
Conserver l’échantillon à 4°C.
I.6.2.2. Concentration des extraits
C’est une étape particulièrement délicate du protocole expérimental. C’est au cours de celle-ci
que les pertes des hydrocarbures par évaporation sont les plus grandes. Sebbih (1991) montre
qu’au-delà de 200µl les pertes deviennent significatives. Le protocole de la Commission
Océanique Intergouvernementale COI, (1984) souligne bien ce risque et recommande de ne
pas dépasser cette limite qui est de 200µl (Sellali, 1997).
La concentration des extraits se fait en deux étapes :
1. Concentration avec l’évaporateur rotatifs jusqu’à un volume de 10ml environ. La
température de bain marie ne doit pas dépasser 69°C (la température d’ébullition de l’hexane
pour ne pas l’évaporer).
2. Concentration sous jet d’azote (N 2 ) jusqu’à un volume de 2ml.
I.6.2.3. Purification
Dans cette étape, on utilise une burette de 50ml de contenance, de 0,1ml de diamètre
interne et munie d’un robinet en téflon est remplie selon la méthode humide, successivement
par :
La laine de verre.