Chapitre 2
Moyens et Méthodes d’analyses
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Méthode de filtration
La méthode de filtration est une estimation plus exacte sur la charge bactérienne, elle
consiste à faire passer des produits liquides sur une paroi poreuse ou sur une membrane qui
retient les bactéries avec un quadrillage en surface facilitant les dénombrements.
La membrane est ensuite déposée sur un milieu nutritif convenable, après incubation les
colonies sont dénombrées et identifiées.
Matériel
-Dispositif de filtration de marque « Sartorius stedim »
-Trois Bec-Bunsen pour garder tout au long de la manipulation la zone de travail stérile ;
- Boites de Pétri avec les milieux de culture spécifiques pour chaque germe ;
-Membranes d’ester de cellulose, filtrantes, quadrillées et stériles (en emballage individuel)
de porosité de 0.45μm et de 47 mm de diamètre susceptibles de retenir les bactéries ;
- Deux Incubateurs (Etuves) ;
- Pompe à vide ;
- Pinces stérilisées et Pipettes.
Mode opératoire
- Stériliser le dispositif de filtration ;
- Mettre en place le dispositif ;
- Mettre le filtre sur la grille ;
- Filtrer un volume d’échantillon (100ml) ;
- Déposer le filtre sur le milieu de culture adapté pour chaque bactérie recherchée;
- Incuber les boites à la température adéquate.