Chapitre II
Matériels et méthodes
Page 17
2.3. Les cultures souches et mères
2.3.1. Cultures souches
Ce sont des algues monospécifiques utilisées pour fournir des cultures mères. Ces cultures
sont maintenues dans des milieux de culture spécifiques comme le milieu de culture
d’Erdschreiber, le milieu F/2, des géloses d’agar enrichi en nutriment en tubes à essai
inclinés (Helm & al, 2006). Un repiquage régulier permet de garder des cellules jeunes avec
un fort potentiel de croissance.
2.3.2. Culture mère
Une lignée de cultures mères est préparée à partir des cultures souches des espèces
souhaitées. Ces cultures sont spécifiquement cultivées pour fournir un inoculum destiné à
démarrer de grands volumes de cultures nécessaires à la production.
2.4. Mode de culture
Les souches sont maintenues séparément sous des conditions contrôlées de lumière et de
température dans des boite de pétrie, et sont seulement utilisées pour inoculer les souches
mères quand c’est nécessaire. Elles ne sont ni aérées ni alimentées en dioxyde de carbone.
Le nom des espèces, ainsi que la date du transfert, doivent être marqués sur les tubes au
feutre indélébile. Les souches mère sont obtenues et gardées auprès des lampes fluorescentes
dans la salle de culture à une température de 18 à 22°C.
Une fois les souches choisis, elles sont repiquées à partir des boites de pétrie dans des tubes
a essais de 10 ml dans des conditions stériles. Puis transférées dans des volumes de 100 ml
qui à leurs tours sont transférés dans des volumes de 500 ml. Le reste est utilisé comme
inoculum pour des cultures de plus grands volumes jusqu’à 25 litres.
Les souches mères (100 ml à 1 litre) sont cultuvées rapidement pendant 7 à 14 jours à des
températures et intensités lumineuses élevées avec un apport d’air enrichi en dioxyde de
carbone (quant c’est possible) a partir des volumes de 500 ml. Quand la culture est prête,
une aliquote est utilisée pour redémarrer une culture et la fraction principale permet d’initier
une culture de volume intermédiaire.
Matériels et méthodes
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2.3. Les cultures souches et mères
2.3.1. Cultures souches
Ce sont des algues monospécifiques utilisées pour fournir des cultures mères. Ces cultures
sont maintenues dans des milieux de culture spécifiques comme le milieu de culture
d’Erdschreiber, le milieu F/2, des géloses d’agar enrichi en nutriment en tubes à essai
inclinés (Helm & al, 2006). Un repiquage régulier permet de garder des cellules jeunes avec
un fort potentiel de croissance.
2.3.2. Culture mère
Une lignée de cultures mères est préparée à partir des cultures souches des espèces
souhaitées. Ces cultures sont spécifiquement cultivées pour fournir un inoculum destiné à
démarrer de grands volumes de cultures nécessaires à la production.
2.4. Mode de culture
Les souches sont maintenues séparément sous des conditions contrôlées de lumière et de
température dans des boite de pétrie, et sont seulement utilisées pour inoculer les souches
mères quand c’est nécessaire. Elles ne sont ni aérées ni alimentées en dioxyde de carbone.
Le nom des espèces, ainsi que la date du transfert, doivent être marqués sur les tubes au
feutre indélébile. Les souches mère sont obtenues et gardées auprès des lampes fluorescentes
dans la salle de culture à une température de 18 à 22°C.
Une fois les souches choisis, elles sont repiquées à partir des boites de pétrie dans des tubes
a essais de 10 ml dans des conditions stériles. Puis transférées dans des volumes de 100 ml
qui à leurs tours sont transférés dans des volumes de 500 ml. Le reste est utilisé comme
inoculum pour des cultures de plus grands volumes jusqu’à 25 litres.
Les souches mères (100 ml à 1 litre) sont cultuvées rapidement pendant 7 à 14 jours à des
températures et intensités lumineuses élevées avec un apport d’air enrichi en dioxyde de
carbone (quant c’est possible) a partir des volumes de 500 ml. Quand la culture est prête,
une aliquote est utilisée pour redémarrer une culture et la fraction principale permet d’initier
une culture de volume intermédiaire.