Chapitre 3
Matériel et méthodes
28
3. Le pH
Il a été mesuré in-situ à l’aide d’un pH-mètre de terrain préalablement calibré de la marque
WTW® modèle pH 315i.
V. Analyse chimique des sels nutritifs
V.1. Méthode d’analyse
La méthode utilisée pour le dosage des sels nutritifs (PO 4
3−
, NO 3
−
, NO 2
-
, NH 4
+
, SiO 2 ) est le
dosage par colorimétrie à flux continu et automatisé sur l’appareil Skalar® San Plus
Analyser selon les protocoles définis par Skalar analytical® (1998).
Les échantillons d’eau de mer sont filtrés à l’aide d’une seringue et des filtres millipores
membranes dont la taille des pores est de 0.45 um, ensuite ils sont remplis dans des tubes de
10ml et sont installés dans un porte tube de l’appareil, l’analyse est ensuite déclenchée et les
résultats d’analyse sont donnés au niveau de l’ordinateur relié à l’appareil via le logiciel
fourni avec l’appareil d’analyse.
Avant le lancement de l’analyse, l’appareil est préparé par un rinçage à l’eau bi-distillée.
V.2. Définition de la colorimétrie
Cette méthode est l'une des méthodes de dosage chimique des sels nutritifs basée sur
l'absorption de la lumière par la solution analysée. Elle est appelée aussi photométrie. Elle est
basée sur la loi de Beer-Lambert qui est définit comme suit :
Loi de Beer-Lambet
L’adsorption et la transmission sont deux phénomènes auxquels est soumise une substance
d’épaisseur (L) traversée par un faisceau lumineux monochromatique. Les quantités de
lumières absorbées (Absorbance) et transmise (transmission) obéissent à la loi de BeerLambert.
A = Ln I o / I = ε.L.C
Où:
I o , I : est l’intensité lumineuse incidente et émergente du milieu absorbant ;
A : est l’absorbance ou densité optique ;
ε : est le coefficient d’extinction moléculaire ;
L : est le trajet optique (épaisseur du milieu absorbant) ;
C : est la concentration du milieu absorbant.
V.3. Matériel utilisé
Auto-analyzer SAN plus System de marque SKALAR®, 1998;
Bi-distillateur MILLI-Q® Reagent Water System ;
Des micropipettes Fortuna ® avec éjecteur d’embout de type DIGITAL , une de 200 à
1000 μl et l’autre de 20 à 250 μl, ainsi que des fioles de 100 et 500 ml ;
Balance, Spatule, entonnoir, bécher et la hôte.
Seringue et filtres millipores membranes.
Matériel et méthodes
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3. Le pH
Il a été mesuré in-situ à l’aide d’un pH-mètre de terrain préalablement calibré de la marque
WTW® modèle pH 315i.
V. Analyse chimique des sels nutritifs
V.1. Méthode d’analyse
La méthode utilisée pour le dosage des sels nutritifs (PO 4
3−
, NO 3
−
, NO 2
-
, NH 4
+
, SiO 2 ) est le
dosage par colorimétrie à flux continu et automatisé sur l’appareil Skalar® San Plus
Analyser selon les protocoles définis par Skalar analytical® (1998).
Les échantillons d’eau de mer sont filtrés à l’aide d’une seringue et des filtres millipores
membranes dont la taille des pores est de 0.45 um, ensuite ils sont remplis dans des tubes de
10ml et sont installés dans un porte tube de l’appareil, l’analyse est ensuite déclenchée et les
résultats d’analyse sont donnés au niveau de l’ordinateur relié à l’appareil via le logiciel
fourni avec l’appareil d’analyse.
Avant le lancement de l’analyse, l’appareil est préparé par un rinçage à l’eau bi-distillée.
V.2. Définition de la colorimétrie
Cette méthode est l'une des méthodes de dosage chimique des sels nutritifs basée sur
l'absorption de la lumière par la solution analysée. Elle est appelée aussi photométrie. Elle est
basée sur la loi de Beer-Lambert qui est définit comme suit :
Loi de Beer-Lambet
L’adsorption et la transmission sont deux phénomènes auxquels est soumise une substance
d’épaisseur (L) traversée par un faisceau lumineux monochromatique. Les quantités de
lumières absorbées (Absorbance) et transmise (transmission) obéissent à la loi de BeerLambert.
A = Ln I o / I = ε.L.C
Où:
I o , I : est l’intensité lumineuse incidente et émergente du milieu absorbant ;
A : est l’absorbance ou densité optique ;
ε : est le coefficient d’extinction moléculaire ;
L : est le trajet optique (épaisseur du milieu absorbant) ;
C : est la concentration du milieu absorbant.
V.3. Matériel utilisé
Auto-analyzer SAN plus System de marque SKALAR®, 1998;
Bi-distillateur MILLI-Q® Reagent Water System ;
Des micropipettes Fortuna ® avec éjecteur d’embout de type DIGITAL , une de 200 à
1000 μl et l’autre de 20 à 250 μl, ainsi que des fioles de 100 et 500 ml ;
Balance, Spatule, entonnoir, bécher et la hôte.
Seringue et filtres millipores membranes.