Chapitre 3 : Matériel et méthodes
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traitement des échantillons. Cette donnée indique d’éventuelles contaminations survenues en
pratique L’augmentation du seuil de détection révélerait l’importance des contaminations.
L’utilisation des blancs de procédure permet de contrôler les étapes de traitement et d’écarter
la contamination des échantillons.
2.6.6 Reproductibilité de la SFUV
La reproductibilité d’une méthode est un terme statistique qui implique sa précision, celleci définit jusqu’à quel degré une détermination représentative d’une substance dans un
échantillon donnera une mesure qui approche la moyenne d’un nombre infini de détermination
de même échantillon (C.O.I, 1982).
La reproduction de la spectrofluorimètre à rayonnement ultraviolet est testée pour l’eau et le
sédiment marin sur des échantillons à concentration moyenne.
Pour l’eau de mer
La reproductibilité est effectuée sur un échantillon de concentration moyenne, les lectures se
font à 360nm, 380nm et 410nm avec une excitation à 310nm. Les résultats obtenus sont résumés
dans le tableau suivant :
Tableau 5: Test de reproductibilité sur la lecture de la concentration d’un échantillon
d’eau de mer
Paramètres
360nm
380nm
410nm
Moyenne
1.003
0.525
0.161
Ecart-type
1.530
3.579
10.889
Erreur relative %
±0.011
±0.03
±0.01
Précision %
98.469
96.427
89.112
La précision et la reproductibilité de la S.F.U.V sont prouvées par les résultats obtenus avec
une augmentation de l’erreur relative à 410nm qui est le domaine d’absorption minimale des
hydrocarbures polyaromatiques.
2.6.7 Mesure des intensités de fluorescence
Les concentrations des hydrocarbures polyaromatiques sont déterminées à partir de
courbe étalon. Les conditions opératoires à la lecture des intensités de fluorescence (IF) sont
les suivantes :
- L’analyse de l’échantillon nécessite une longueur d’onde d’excitation 310 nm.
- L’émission de fluorescence est mesurée entre 310 et 500nm pour des longueurs d’ondes
d’émission fixées à 360 nm, 380nm et 410 nm avec un pic d’absorption maximale à 360
nm pour les hydrocarbures aromatiques polynucléaires.
- L’ouverture des fentes d’excitation et d’émission est respectivement égale à 2 nm et 5
nm.
L’intensité de fluorescence (IF) est proportionnelle à la concentration C de l’échantillon dans
la gamme étalon de réponse linéaire du spectrofluorimètre déterminée par la courbe
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traitement des échantillons. Cette donnée indique d’éventuelles contaminations survenues en
pratique L’augmentation du seuil de détection révélerait l’importance des contaminations.
L’utilisation des blancs de procédure permet de contrôler les étapes de traitement et d’écarter
la contamination des échantillons.
2.6.6 Reproductibilité de la SFUV
La reproductibilité d’une méthode est un terme statistique qui implique sa précision, celleci définit jusqu’à quel degré une détermination représentative d’une substance dans un
échantillon donnera une mesure qui approche la moyenne d’un nombre infini de détermination
de même échantillon (C.O.I, 1982).
La reproduction de la spectrofluorimètre à rayonnement ultraviolet est testée pour l’eau et le
sédiment marin sur des échantillons à concentration moyenne.
Pour l’eau de mer
La reproductibilité est effectuée sur un échantillon de concentration moyenne, les lectures se
font à 360nm, 380nm et 410nm avec une excitation à 310nm. Les résultats obtenus sont résumés
dans le tableau suivant :
Tableau 5: Test de reproductibilité sur la lecture de la concentration d’un échantillon
d’eau de mer
Paramètres
360nm
380nm
410nm
Moyenne
1.003
0.525
0.161
Ecart-type
1.530
3.579
10.889
Erreur relative %
±0.011
±0.03
±0.01
Précision %
98.469
96.427
89.112
La précision et la reproductibilité de la S.F.U.V sont prouvées par les résultats obtenus avec
une augmentation de l’erreur relative à 410nm qui est le domaine d’absorption minimale des
hydrocarbures polyaromatiques.
2.6.7 Mesure des intensités de fluorescence
Les concentrations des hydrocarbures polyaromatiques sont déterminées à partir de
courbe étalon. Les conditions opératoires à la lecture des intensités de fluorescence (IF) sont
les suivantes :
- L’analyse de l’échantillon nécessite une longueur d’onde d’excitation 310 nm.
- L’émission de fluorescence est mesurée entre 310 et 500nm pour des longueurs d’ondes
d’émission fixées à 360 nm, 380nm et 410 nm avec un pic d’absorption maximale à 360
nm pour les hydrocarbures aromatiques polynucléaires.
- L’ouverture des fentes d’excitation et d’émission est respectivement égale à 2 nm et 5
nm.
L’intensité de fluorescence (IF) est proportionnelle à la concentration C de l’échantillon dans
la gamme étalon de réponse linéaire du spectrofluorimètre déterminée par la courbe