Matériels et méthodes
Chapitre III
- 36 -
L’absorption de l’énergie lumineuse dépend de l’intensité de la coloration, de même, ce dernier
est d’autant plus importante que la solution est concentrée en sel dosé.
La quantité de lumière absorbée par la solution, appelée absorbance (A) ou densité optique(D.O),
obéit à la loi de BEER-LAMBERT qui est exprimée par la relation suivant
I 0 et I: sont respectivement les intensités lumineuses incidentes et émergentes du milieu
absorbant.
ɛ : le coefficient d’extinction molaire variant en fonction de la température et la longueur.
L : la longueur du milieu traversé exprimé en cm.
C : concentration de la solution absorbante exprimée en mol/l.
D.O : densité optique de la solution.
F.2. Analyse automatique des sels nutritifs
F.2.1. Dosage de l’azote ammoniacal :
En milieu alcalin (8‹PH‹11,5), l’ammonium dissous réagit sur l’hypochlorite pour former une
monochloramine. Ce composée, en présence de phénol et d’un excès d’hypochlorite (milieu
oxydant) donne lieu à la formation d’un bleu d’indophénol. La réaction est catalysée par le
nitroprussiate de sodium et le maximum d’absorption se fait à une longueur d’onde de 630 nm
(Skalar, 1996).
F.2.2. Dosage des nitrites :
Les nitrites (NO 2
-
) forment un diazoïque par action avec la sulfanilamide en milieu acide pH<2.
Ce composé formera ensuite en présence de N-naphylethylènediamine un composé azoïque de
couleur rose absorbant la lumière à 450nm (BENSCHNEIDER et ROBINSON, 1952).
F.2.3. Dosage des nitrates :
La méthode est basée sur la réduction des nitrates (NO 3
-
) en nitrites (NO
-
2 ) par le passage de
l’échantillon à travers une colonne réductrice de cadmium traité au cuivre (WOOD et al, 1967).
Les nitrites (en réalité NO
-
2 + NO 3
- réduits) seront ensuite dosés par colorimétrie selon la
méthode précédemment décrite. Il suffira alors d’en déduire la concentration de nitrites
déterminés directement (sans passage de l’échantillon sur la colonne réductrice) pour trouver les
concentrations des nitrates (RODIER et al, 1996).
A=D.O= log (I 0 /I) = ɛ * L* C
Chapitre III
- 36 -
L’absorption de l’énergie lumineuse dépend de l’intensité de la coloration, de même, ce dernier
est d’autant plus importante que la solution est concentrée en sel dosé.
La quantité de lumière absorbée par la solution, appelée absorbance (A) ou densité optique(D.O),
obéit à la loi de BEER-LAMBERT qui est exprimée par la relation suivant
I 0 et I: sont respectivement les intensités lumineuses incidentes et émergentes du milieu
absorbant.
ɛ : le coefficient d’extinction molaire variant en fonction de la température et la longueur.
L : la longueur du milieu traversé exprimé en cm.
C : concentration de la solution absorbante exprimée en mol/l.
D.O : densité optique de la solution.
F.2. Analyse automatique des sels nutritifs
F.2.1. Dosage de l’azote ammoniacal :
En milieu alcalin (8‹PH‹11,5), l’ammonium dissous réagit sur l’hypochlorite pour former une
monochloramine. Ce composée, en présence de phénol et d’un excès d’hypochlorite (milieu
oxydant) donne lieu à la formation d’un bleu d’indophénol. La réaction est catalysée par le
nitroprussiate de sodium et le maximum d’absorption se fait à une longueur d’onde de 630 nm
(Skalar, 1996).
F.2.2. Dosage des nitrites :
Les nitrites (NO 2
-
) forment un diazoïque par action avec la sulfanilamide en milieu acide pH<2.
Ce composé formera ensuite en présence de N-naphylethylènediamine un composé azoïque de
couleur rose absorbant la lumière à 450nm (BENSCHNEIDER et ROBINSON, 1952).
F.2.3. Dosage des nitrates :
La méthode est basée sur la réduction des nitrates (NO 3
-
) en nitrites (NO
-
2 ) par le passage de
l’échantillon à travers une colonne réductrice de cadmium traité au cuivre (WOOD et al, 1967).
Les nitrites (en réalité NO
-
2 + NO 3
- réduits) seront ensuite dosés par colorimétrie selon la
méthode précédemment décrite. Il suffira alors d’en déduire la concentration de nitrites
déterminés directement (sans passage de l’échantillon sur la colonne réductrice) pour trouver les
concentrations des nitrates (RODIER et al, 1996).
A=D.O= log (I 0 /I) = ɛ * L* C