Chapitre III : Matériel et méthodes
Impact de la pollution marine par les hydrocarbures
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Les échantillons sont conservés au frais (-4°C) et à l’abri de la lumière.
Cette précaution est de mise étant donné la photosensibilité de certains
HAP ;
Avant d’être analysés, les hydrocarbures doivent subir un prétraitement
et de traitement.
III.2.2. Extraction :
Une première extraction est effectuée immédiatement après le prélèvement en
ajoutant 50 ml de l’hexane pour chaque échantillon et agiter pendant 3 minutes.
L’hexane est un solvant organique plus léger que l’eau, au moment de l’agitation,
il permet la dispersion du solvant dans l’eau de mer et la formation d’une phase organique
non miscible à la phase aqueuse, piégeant ainsi les hydrocarbures présents dans l’eau de mer.
En versant dans une ampoule à décanter le volume total d’échantillon (2,5 l), et
en ajoutant 50 ml d’hexane on procède à une agitation mécanique pendant 20 minutes
environ,
A la fin de chaque agitation, on laisse reposer pour un quart d’heure, après
décantation, soutirer l’extrait qui constitue la phase organique supérieure de l’ampoule dans
une Erlenmeyer à col rodé
Déshydrater cet extrait en lui ajoutant 2g du sulfate de sodium anhydre (Smail et
Mazouz, 1996).
III.2.3. Concentration :
Cette une étape particulièrement délicate du protocole expérimentale. C’est au
cours de celle-ci que les risques de pertes des hydrocarbures par évaporation sont les plus
grandes. Sebbih, (1991) montre qu’au-delà de 200 µl les pertes deviennent significatives. Le
protocole de la COI, 1984 souligne bien ce risque et recommande de ne pas dépasser cette
limite (200 µl).
Néanmoins, d’autres auteurs ne font pas grand cas de ces risques puisque la
concentration à sec est une étape de la procédure analytique (Roussel, 1983 et Balci, 1994)
Les étapes de la concentration sont les suivantes :
Concentrer l’extrait à l’aide d’un évaporateur rotatif (LABOROTA 4000efficient Heidolph) à une température inférieur à 60 °C sous pression réduite (1,5
bars) pour éviter l’évaporation des hydrocarbures, jusqu’à 5 ml environ, il
s’agit d’éliminer le solvant d’extraction.
Eliminer éventuellement les traces d’eaux résiduelles du concentrât par addition
du sulfate de sodium anhydre dans un ballon de l’évaporateur.
Transférer l’extrait déshydraté dans un tube gradué de 20 ml (en opérant
lentement le sulfate du sodium au fond du ballon)
Evaporer à sec l’extrait organique, dans le tube sous jet d’azote purifié jusqu’à
un volume de 2 ml
Impact de la pollution marine par les hydrocarbures
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Les échantillons sont conservés au frais (-4°C) et à l’abri de la lumière.
Cette précaution est de mise étant donné la photosensibilité de certains
HAP ;
Avant d’être analysés, les hydrocarbures doivent subir un prétraitement
et de traitement.
III.2.2. Extraction :
Une première extraction est effectuée immédiatement après le prélèvement en
ajoutant 50 ml de l’hexane pour chaque échantillon et agiter pendant 3 minutes.
L’hexane est un solvant organique plus léger que l’eau, au moment de l’agitation,
il permet la dispersion du solvant dans l’eau de mer et la formation d’une phase organique
non miscible à la phase aqueuse, piégeant ainsi les hydrocarbures présents dans l’eau de mer.
En versant dans une ampoule à décanter le volume total d’échantillon (2,5 l), et
en ajoutant 50 ml d’hexane on procède à une agitation mécanique pendant 20 minutes
environ,
A la fin de chaque agitation, on laisse reposer pour un quart d’heure, après
décantation, soutirer l’extrait qui constitue la phase organique supérieure de l’ampoule dans
une Erlenmeyer à col rodé
Déshydrater cet extrait en lui ajoutant 2g du sulfate de sodium anhydre (Smail et
Mazouz, 1996).
III.2.3. Concentration :
Cette une étape particulièrement délicate du protocole expérimentale. C’est au
cours de celle-ci que les risques de pertes des hydrocarbures par évaporation sont les plus
grandes. Sebbih, (1991) montre qu’au-delà de 200 µl les pertes deviennent significatives. Le
protocole de la COI, 1984 souligne bien ce risque et recommande de ne pas dépasser cette
limite (200 µl).
Néanmoins, d’autres auteurs ne font pas grand cas de ces risques puisque la
concentration à sec est une étape de la procédure analytique (Roussel, 1983 et Balci, 1994)
Les étapes de la concentration sont les suivantes :
Concentrer l’extrait à l’aide d’un évaporateur rotatif (LABOROTA 4000efficient Heidolph) à une température inférieur à 60 °C sous pression réduite (1,5
bars) pour éviter l’évaporation des hydrocarbures, jusqu’à 5 ml environ, il
s’agit d’éliminer le solvant d’extraction.
Eliminer éventuellement les traces d’eaux résiduelles du concentrât par addition
du sulfate de sodium anhydre dans un ballon de l’évaporateur.
Transférer l’extrait déshydraté dans un tube gradué de 20 ml (en opérant
lentement le sulfate du sodium au fond du ballon)
Evaporer à sec l’extrait organique, dans le tube sous jet d’azote purifié jusqu’à
un volume de 2 ml