Chapitre II
Matériel et méthodes
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Où :
IF0 : Intensité de fluorescence avant acidification (U.A) ;
IFa : Intensité de fluorescence après acidification (U.A) ;
K0 : Coefficient d'étalonnage établie avec de la chlorophylle a pure avant acidification ;
Ka : Coefficient d'étalonnage établie avec de la chlorophylle a pure après acidification ;
VE : Le volume d’extraction (VE = 6ml) ;
VF : Le volume de l’échantillon filtré (VF = 250 ml).
4.1.5. Dosage des sels nutritifs
a. Méthode d’analyse
Dans notre étude, le dosage des sels nutritifs (NO 3
-
, NO 2
-
, PO 4
3, SiO 2 et NH 4
+ ) s’est fait par
colorimétrie à flux continu sur chaine automatisée « Auto Analyser San Plus » S.F.A.S troisième
génération (Annexe I ) selon les protocoles définis par SKALAR, 1998.
Le mode opératoire détaillé pour le dosage de chaque sel ainsi que les réactifs utilisés sont
consignés en annexe I.
b. Principe
Le principe de dosage des sels nutritifs est basé sur une réaction de coloration. En effet ces
sels réagissent dans certaines conditions (T°, C, pH, Catalyseur …) avec des réactifs spécifiques
pour donner naissance à une coloration absorbant la lumière à une certaine longueur d’ondes (λ).
L’absorption de l’énergie lumineuse dépend de l’intensité de la coloration, de même ce dernier est
d’autant plus importante que la solution est concentrée en sel dosé. La colorimétrie est basée sur la
loi de Beer-Lambert qui est exprimée par l’expression suivante :
A = D.O =Log (I/I 0 ) = Ɛ*I*C
 I 0 : Intensité lumineuse incidente
 I : Intensité lumineuse émergente.
 Ɛ: Coefficient d’extinction molaire.
 C : Concentration de la solution absorbante en mol/l.
 A : Absorbance de la solution.
 D.O : Densité optique de la solution.