Chapitre III
Matériels et méthodes
20
3.3. Dosage des hydrocarbures poly aromatiques
3.3.1. Eau de mer
Les prélèvements d’eau à la surface sont réalisés grâce a un dispositif d’échantillonnage
constitués d’une bouteille en verre teintée d’une capacité de 2.5 litres et d’un support lesté.
Pour éviter tous risques de contamination des échantillons par les rejets du bateau, les
prélèvements sont effectués à l’avant.
Les bouteilles sont refermées avec des bouchons en téflon et pour plus de sécurité avec
du papier aluminium.
Pour chaque échantillon d’eau il faux ajouter 50 ml de l’hexane et agiter pendant 3
minutes. L’échantillon est conservé au frais et à l’abri de la lumière.
Avant d’être analysés, les hydrocarbures doivent êtres subir un prétraitement :
3.3.1.1. Extraction
Immédiatement après le prélèvement, environ 100 ml sont rejetés de la bouteille
d’échantillonnage pour ajouter de l’hexane.
Ce dernier est un solvant organique plus léger que l’eau, au moment de l’agitation, il permet
la dispersion du solvant dans l’eau de mer et la formation d’une phase organique non miscible
a la phase aqueuse, piégeant ainsi les hydrocarbures présents dans l’eau de mer.
En ajoutant 50 ml de l’hexane, on procède à une agitation mécanique dans les ampoules à
décanter pendant une durée de 20 minutes environ. A la fin de chaque agitation, on laisse
l’eau de mer se décanter pour un quart d’heure.
Après décantation, la phase organique supérieure de l’ampoule est récupérée dans un
erlenmeyer a col rodé ou l’on ajoute du sodium anhydre (Na 2 SO 4 ) afin d’éliminer toute trace
d’eau (Smail et mazouz, 1996)
3.3.1.2. Concentration
Cette opération est réalisée dans le but d’éliminer le solvant d’extraction à l’aide d’un
évaporateur rotatif. Pour éviter l’évaporation des hydrocarbures aromatiques à point
d’ébullition bas, on concentre nos échantillons jusqu’à un volume de 15 ml. Pour minimiser
cette perte, on maintient le bain-marie à une température de 40 °c; il subit ensuite une
deuxième concentration sous jet d’azote jusqu’à un volume de 5ml.
3.3.1.3. Purification
La purification est généralement réalisée par chromatographie liquide sur colonne ouverte de
10 mm de diamètre pour la rétention des composés polaires (les lipides). Cette purification est
nécessaire lors de l’utilisation du tétrachlorure de carbone (CCL 4 ) comme solvant
d’extraction.
Matériels et méthodes
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3.3. Dosage des hydrocarbures poly aromatiques
3.3.1. Eau de mer
Les prélèvements d’eau à la surface sont réalisés grâce a un dispositif d’échantillonnage
constitués d’une bouteille en verre teintée d’une capacité de 2.5 litres et d’un support lesté.
Pour éviter tous risques de contamination des échantillons par les rejets du bateau, les
prélèvements sont effectués à l’avant.
Les bouteilles sont refermées avec des bouchons en téflon et pour plus de sécurité avec
du papier aluminium.
Pour chaque échantillon d’eau il faux ajouter 50 ml de l’hexane et agiter pendant 3
minutes. L’échantillon est conservé au frais et à l’abri de la lumière.
Avant d’être analysés, les hydrocarbures doivent êtres subir un prétraitement :
3.3.1.1. Extraction
Immédiatement après le prélèvement, environ 100 ml sont rejetés de la bouteille
d’échantillonnage pour ajouter de l’hexane.
Ce dernier est un solvant organique plus léger que l’eau, au moment de l’agitation, il permet
la dispersion du solvant dans l’eau de mer et la formation d’une phase organique non miscible
a la phase aqueuse, piégeant ainsi les hydrocarbures présents dans l’eau de mer.
En ajoutant 50 ml de l’hexane, on procède à une agitation mécanique dans les ampoules à
décanter pendant une durée de 20 minutes environ. A la fin de chaque agitation, on laisse
l’eau de mer se décanter pour un quart d’heure.
Après décantation, la phase organique supérieure de l’ampoule est récupérée dans un
erlenmeyer a col rodé ou l’on ajoute du sodium anhydre (Na 2 SO 4 ) afin d’éliminer toute trace
d’eau (Smail et mazouz, 1996)
3.3.1.2. Concentration
Cette opération est réalisée dans le but d’éliminer le solvant d’extraction à l’aide d’un
évaporateur rotatif. Pour éviter l’évaporation des hydrocarbures aromatiques à point
d’ébullition bas, on concentre nos échantillons jusqu’à un volume de 15 ml. Pour minimiser
cette perte, on maintient le bain-marie à une température de 40 °c; il subit ensuite une
deuxième concentration sous jet d’azote jusqu’à un volume de 5ml.
3.3.1.3. Purification
La purification est généralement réalisée par chromatographie liquide sur colonne ouverte de
10 mm de diamètre pour la rétention des composés polaires (les lipides). Cette purification est
nécessaire lors de l’utilisation du tétrachlorure de carbone (CCL 4 ) comme solvant
d’extraction.