Avec :
 m i : Poids du filtre sec avant filtration (mg).
 m f : Poids du filtre sec après filtration (mg).
 V : Volume d’eau filtrée (litre).
Dosage de la chlorophylle a par la Spectrofluorimétrie ultraviolet (S.F.U.V)
Réactifs
 Suspension carbonate de magnésium MgCO3 à 1 % ;
 Solvant d'extraction : Méthanol pur pour analyse à 99,7 % ;
 Solution d'acide chloridrique 0,5N.
Mode opératoire
 Les échantillons de la première sortie sont contenus dans des flacons de 250 ml et sont mis
directement après leur prélèvement à l‟ombre et mis au congélateur pour leur conservation,
alors que lors de la deuxième sortie, les échantillons sont filtrés directement ;
 Pour les deux sortie, la filtration c’est faite sur des filtres en fibre de verre Whatman GF/F de
diamètre 25 mm, après ajout de quelques gouttes de MgCO3 ;
 Après la filtration, le filtre est plié sur quatre et enrobé dans du papier aluminium déjà
étiqueté. Ensuite les filtre sont conservés dans un congélateur ;
 Mettre le filtre dans un tube après son conditionnement avec du méthanol ;
 Ajouter 7 ml de méthanol à 99,7 % dans le tube contenant le filtre ;
 Le tube est ensuite bouché et placé à l‟obscurité dans un réfrigérateur (5 °C), pour une période
d'extraction de 30 minutes.
 Après 30 minutes d’extraction, placé dans la centrifugeuse à 3000 tours/min, pendant 2
minutes ; Allumer l'appareil et la lampe une heure avant les mesures ;
 Régler le zéro de l'appareil avec un tube témoin contenant un filtre vierge ayant subi les
mêmes traitements que les échantillons, excepté la filtration du plancton ;
 Après ce délai la fluorescence de l'échantillon est mesurée sur le spectrophotomètre
fluorescence dans la cellule en quartz.
Etalonnage
Les experts de la COI (1984) recommandent l’utilisation d’une solution de chlorophylle
pure comme étalon de référence. L’étalonnage est réalisé à l’aide d’une série de cinq
standards, et un blanc du méthanol une droite d’étalonnage de la chlorophylle.
Préparation des standards
Les standards STD1, STD2, STD3, STD4 et STD5 sont préparés à partir de la solution
de chlorophylle pure de concentration 04 mg/l. Ils sont obtenus par dissolution de 1 mg de
chlorophylle pure dans 10 ml de méthanol (Tableau 02).