Chapitre 3
Matériels et Méthodes
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d. Mode opératoire
Ø Introduire, dans une éprouvette en polyéthylène de 50 ml, 10 ml de réactifs 1.
Ø Ajouter à la pipette 25 ml d’échantillon, boucher et mélanger.
Ø Attendre au minimum 10 min mais jamais plus de 30 min, et noter ce temps à 1/2
min près afin d’opérer toujours de façon identique pour tous les échantillons et les
étalons.
Ø Ajouter rapidement le réactif 2, fraichement préparé, pour à 50 ml et mélanger
aussitôt.
Ø Attendre 2 à 3 heurs et mesurer l’absorbance A tr en cuve de 1 cm par rapport à
l’eau distillée, à 810 nm.
II.4.4. Calcul et expression des résultats
a. Les absorbances
Atr : Absorbance mesurée pour l’échantillon traité (après correction du blanc des cuves).
bt : Absorbance mesurée pour la turbidité (après correction des blancs des cuves).
br : Absorbance mesurée pour le blanc des réactifs (après correction des blancs des cuves).
A = Atr – bt – br (pour chaque élément nutritifs), reportée sur la courbe d’étalonnage pour
en déduire la concentration de l’échantillon.
R : Le rendement de réduction des ions nitrate en nitrite (R ≤ 1).
r : la fraction des ions nitrites non réduits par la colonne (r ≤ 1).
P : C’est la pente de courbe d’étalonnage pour chaque élément nutritif.
b. Les concentrations
[N-NH 3 , 4 ] (μmol/l) = A/P
[N-NO 2
-
] (μmol/l) = A/P
[NO 3
-
] (μmol/l) = [NO 2
- + NO 3
-
] μmol/l * 1/R - [NO 2
-
] μmol/l * r/R
[PO 4
3] (μmol/l) = A/P
[SiO 2
-
] (μmol/l) = A/P