Chapitre III
Matériel et méthodes d’analyse
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Matériel
1. Rampe de filtration à six postes (voir figure III.6).
2. Pompe à vide.
3. Deux becs bunsen pour garder la zone de travail stérile tout au long de la manipulation.
4. Boites de Pétri avec milieux de culture spécifiques pour chaque germe.
5. Membrane de filtration quadrillée et stérile de marque Millipore et porosité de 0.45µm.
6. Deux étuves (une réglée à 37°C et l’autre à 44°C).
7. Pinces et pissettes.
Mode opératoire :
1. Stériliser le dispositif de filtration en le flambant avec de l’alcool ;
2. Laisser refroidir et placer les filtres ;
3. Filtrer 100 ml de l’échantillon « eau de mer » ;
4. Mettre les filtres dans les boites de Pétri contenant le milieu adéquat ;
5. Placer les boites de Pétri dans l’étuve.
La composition des milieux de culture utilisés est consignée en annexe.
a).dénombrement des staphylocoques dont Staphylococcus aureus
Filtration de 100 ml d’eau de mer.
Incubation à 37°C
pendant 24h à 48h.
Figure III.6: Dénombrement des Staphylocoques dans la matrice
eau de mer.