Matériels et Méthodes
L’identification des espèces a été réalisée en se basant sur les clés de détermination
de Bourrelly (1966) ; Iltis (1980) ; Hoff et Snell (2001). Deux espèces de microalgues ont
été identifiées à savoir : Chlamydomonas sp et Scenedesmus sp.
II-1-2- Entretien des souches :
Les souches doivent être repiquées tous les quinze jours afin de les maintenir en bonne
conditions. Cette durée entre chaque repiquage est idéale pour conserver des cellules
jeunes avec un bon potentiel de multiplication (Audineau, 1985).
Le repiquage s’effectue sur milieu BG11 gélosé, (dont la composition figure en
Annexe 01). Car tous les souches de microalgues unicellulaires peuvent bien pousser en
milieu (BG11) (Stanier et al., 1971).
II-2- Purification des souches:
La contamination par des bactéries, des protozoaires ou d'une espèce d'algues est un
problème grave pour les cultures mono-spécifiques ou axéniques de microalgues.
Les méthodes de purification ne sont pas difficiles, mais la préparation de cultures
axéniques (sans bactéries) peut exiger la patience et la persévérance (Stein, 1973).
Tout d’abord les microalgues doivent croitre dans leurs milieux, lorsque la culture est
suffisamment dense, le traitement débute.
II-2-1- Choix du milieu de culture :
Pour évaluer de façon satisfaisante les différents composants de la flore Algale d’un
biotope donné il est préférable d’utiliser des milieux et/ ou des conditions d’incubations
sélectifs (Reynold et Roger, 1977).
• Pour l’espèce Chlamydomonas, le milieu choisi est le tri-acétate-phosphate (TAP)
(dont la composition figure en Annexe 02), cela est justifié par son efficacité rapportée
dans les travaux de recherche portant sur la culture de cette espèce (Lembi, 1976).
• Scenedesmus a été testée dans deux milieux de culture : Bold Basal (BBM)
(Jayashree et al., 2012) (dont la composition figure en Annexe 03) et Bold Basal
modifié (6NBBM), 6N : 6 fois concentré en azote. Ce milieu est caractérisé par sa
richesse par rapport au BG11 (milieu de conservation) en certaines substances telles
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L’identification des espèces a été réalisée en se basant sur les clés de détermination
de Bourrelly (1966) ; Iltis (1980) ; Hoff et Snell (2001). Deux espèces de microalgues ont
été identifiées à savoir : Chlamydomonas sp et Scenedesmus sp.
II-1-2- Entretien des souches :
Les souches doivent être repiquées tous les quinze jours afin de les maintenir en bonne
conditions. Cette durée entre chaque repiquage est idéale pour conserver des cellules
jeunes avec un bon potentiel de multiplication (Audineau, 1985).
Le repiquage s’effectue sur milieu BG11 gélosé, (dont la composition figure en
Annexe 01). Car tous les souches de microalgues unicellulaires peuvent bien pousser en
milieu (BG11) (Stanier et al., 1971).
II-2- Purification des souches:
La contamination par des bactéries, des protozoaires ou d'une espèce d'algues est un
problème grave pour les cultures mono-spécifiques ou axéniques de microalgues.
Les méthodes de purification ne sont pas difficiles, mais la préparation de cultures
axéniques (sans bactéries) peut exiger la patience et la persévérance (Stein, 1973).
Tout d’abord les microalgues doivent croitre dans leurs milieux, lorsque la culture est
suffisamment dense, le traitement débute.
II-2-1- Choix du milieu de culture :
Pour évaluer de façon satisfaisante les différents composants de la flore Algale d’un
biotope donné il est préférable d’utiliser des milieux et/ ou des conditions d’incubations
sélectifs (Reynold et Roger, 1977).
• Pour l’espèce Chlamydomonas, le milieu choisi est le tri-acétate-phosphate (TAP)
(dont la composition figure en Annexe 02), cela est justifié par son efficacité rapportée
dans les travaux de recherche portant sur la culture de cette espèce (Lembi, 1976).
• Scenedesmus a été testée dans deux milieux de culture : Bold Basal (BBM)
(Jayashree et al., 2012) (dont la composition figure en Annexe 03) et Bold Basal
modifié (6NBBM), 6N : 6 fois concentré en azote. Ce milieu est caractérisé par sa
richesse par rapport au BG11 (milieu de conservation) en certaines substances telles
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