Chapitre III
Matériel et méthodes
45
Les concentrations des hydrocarbures polyaromatiques sont déterminées à partir d’un courbe
étalon. Les conditions opératoires à la lecture des intensités de fluorescence (IF) sont les
suivantes :
L’analyse de l’échantillon nécessite une longueur d’onde d’excitation de 310 nm.
L’émission de fluorescence est mesurée entre 310 et 500nm pour des longueurs
d’ondes d’émission fixées à 360 nm, 380nm et 410 nm avec un pic d’absorption
maximale à 360 nm pour les hydrocarbures aromatiques polynucléaires.
L’ouverture des fentes d’excitation et d’émission est respectivement égale à 2 nm et
5nm.
L’intensité de fluorescence (IF) est proportionnelle à la concentration C de l’échantillon dans
la gamme étalon de réponse linéaire du spectrofluorométrie déterminée par la courbe
d’étalonnage. Elle permet d’établir le tracé d’une droite d’étalonnage pour chaque longueur
d’onde d’émission.
III.3.1.7. Calcul des concentrations finales en hydrocarbures polyaromatiques
Les concentrations en hydrocarbures aromatiques sont :
Pour l’eau :
La concentration d’HPA dans les échantillons d’eau de mer est calculée selon la relation
suivante :
[C]finale : concentration massique finale des HPA dans l’échantillon d’eau de mer en μg/L.
Vp = volume finale de l’extrait de la fraction F2 en ml.
Vf = volume de l’échantillon en L.
Ce= concentration massique de l’extrait en μg/ml.
Pour les sédiments :
La concentration d’HPA dans les sédiments marins est calculée selon la relation suivante :
[C]finale : concentration massique finale des HPA dans l’échantillon en μg/g.
[C]finale = Ce x Vp /Vf
[C] finale = (Ce-Cb) x V/Ps
Matériel et méthodes
45
Les concentrations des hydrocarbures polyaromatiques sont déterminées à partir d’un courbe
étalon. Les conditions opératoires à la lecture des intensités de fluorescence (IF) sont les
suivantes :
L’analyse de l’échantillon nécessite une longueur d’onde d’excitation de 310 nm.
L’émission de fluorescence est mesurée entre 310 et 500nm pour des longueurs
d’ondes d’émission fixées à 360 nm, 380nm et 410 nm avec un pic d’absorption
maximale à 360 nm pour les hydrocarbures aromatiques polynucléaires.
L’ouverture des fentes d’excitation et d’émission est respectivement égale à 2 nm et
5nm.
L’intensité de fluorescence (IF) est proportionnelle à la concentration C de l’échantillon dans
la gamme étalon de réponse linéaire du spectrofluorométrie déterminée par la courbe
d’étalonnage. Elle permet d’établir le tracé d’une droite d’étalonnage pour chaque longueur
d’onde d’émission.
III.3.1.7. Calcul des concentrations finales en hydrocarbures polyaromatiques
Les concentrations en hydrocarbures aromatiques sont :
Pour l’eau :
La concentration d’HPA dans les échantillons d’eau de mer est calculée selon la relation
suivante :
[C]finale : concentration massique finale des HPA dans l’échantillon d’eau de mer en μg/L.
Vp = volume finale de l’extrait de la fraction F2 en ml.
Vf = volume de l’échantillon en L.
Ce= concentration massique de l’extrait en μg/ml.
Pour les sédiments :
La concentration d’HPA dans les sédiments marins est calculée selon la relation suivante :
[C]finale : concentration massique finale des HPA dans l’échantillon en μg/g.
[C]finale = Ce x Vp /Vf
[C] finale = (Ce-Cb) x V/Ps