Chapitre II
Matériel et méthodes
15
Mode opératoire
Des échantillons d’eau (500ml) sont filtrés sur des disques filtrants en fibre de verre (Wattman
GF/C, diamètre 47 mm) (Aminot & Chaussepied, 1983).
Chaque filtre est ensuite plié, mis dans du papier aluminium (portant le numéro de la station, la
profondeur et la date de prélèvement) et immédiatement congelé à (– 20°C).
L’extrait et le dosage de la chlorophylle a été réalisé selon la méthode de Lorenzen (1967) in
(Aminot & Chaussepied, 1983).
Avant la décongélation des filtres, l’extraction des pigments s’effectue dans des tubes en verre
contenant 10 ml d’acétone à 90%. Ces tubes sont recouverts par du papier aluminium et sont
immédiatement placé au réfrigérateur (environ 4°C) pendant 24 heures.
L’absorbance de l’extrait pigmentaire dans le solvant est ensuite estimée avant (
) et après
acidification ( ) avec 10 à 20 µl d’acide chlorhydrique (HCL 0,3 mol/l).
Les lectures d’absorbances sont effectuées sur un spectrophotomètre aux longueurs d’ondes 665
nm et 750 nm avant et après acidification.
Le calcul des concentrations de la chlorophylle a se fait à partir de l’équation de Lorenzen (1967)
in (Aminot & Kérouel, 2004) :
[Chlorophylle a] (mg/m³) =
,
×
×
V : volume de l’eau filtrée (l).
v : volume de solvant d’extraction (ml)
l : longueur du trajet optique de la cuve de mesure (cm).
: absorbance nette corrigée (avant acidification).
: absorbance nette corrigée (aprés acidi ication).
II.3.1.6 Dosage des sels nutritifs
Principe des dosages des sels nutritifs
La méthode du dosage des sels nutritifs (ammonium, nitrites, nitrates, orthophosphates et
silicates) est basée sur une réaction de la coloration. Ces sels réagissent dans des conditions
(présence de catalyseurs, température, pH,…) avec des réactifs spécifiques (voir annexe) pour
donner une coloration absorbant la lumière à une certaine longueur d’onde (λ).
Matériel et méthodes
15
Mode opératoire
Des échantillons d’eau (500ml) sont filtrés sur des disques filtrants en fibre de verre (Wattman
GF/C, diamètre 47 mm) (Aminot & Chaussepied, 1983).
Chaque filtre est ensuite plié, mis dans du papier aluminium (portant le numéro de la station, la
profondeur et la date de prélèvement) et immédiatement congelé à (– 20°C).
L’extrait et le dosage de la chlorophylle a été réalisé selon la méthode de Lorenzen (1967) in
(Aminot & Chaussepied, 1983).
Avant la décongélation des filtres, l’extraction des pigments s’effectue dans des tubes en verre
contenant 10 ml d’acétone à 90%. Ces tubes sont recouverts par du papier aluminium et sont
immédiatement placé au réfrigérateur (environ 4°C) pendant 24 heures.
L’absorbance de l’extrait pigmentaire dans le solvant est ensuite estimée avant (
) et après
acidification ( ) avec 10 à 20 µl d’acide chlorhydrique (HCL 0,3 mol/l).
Les lectures d’absorbances sont effectuées sur un spectrophotomètre aux longueurs d’ondes 665
nm et 750 nm avant et après acidification.
Le calcul des concentrations de la chlorophylle a se fait à partir de l’équation de Lorenzen (1967)
in (Aminot & Kérouel, 2004) :
[Chlorophylle a] (mg/m³) =
,
×
×
V : volume de l’eau filtrée (l).
v : volume de solvant d’extraction (ml)
l : longueur du trajet optique de la cuve de mesure (cm).
: absorbance nette corrigée (avant acidification).
: absorbance nette corrigée (aprés acidi ication).
II.3.1.6 Dosage des sels nutritifs
Principe des dosages des sels nutritifs
La méthode du dosage des sels nutritifs (ammonium, nitrites, nitrates, orthophosphates et
silicates) est basée sur une réaction de la coloration. Ces sels réagissent dans des conditions
(présence de catalyseurs, température, pH,…) avec des réactifs spécifiques (voir annexe) pour
donner une coloration absorbant la lumière à une certaine longueur d’onde (λ).