CHAPITRE II
Matériel et méthodes
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Test confirmatif
BEA
(gélose
BileEsculine-Azide)
C’est un milieu
sélectif des
streptocoques peu
exigeants.
Il
contient 2
inhibiteurs :
- la bile de bœuf
- azide de sodium
- Transférer la membrane du
test présomptif sur le milieu
BEA ;
- Laisser sur la paillasse à la
température
ambiante
pendant 20 minutes.
Colonies présentant
une couleur noire à
brun, esculine
+ :
typique des
streptocoques du
groupe D
Staphylocoqu
es
Chapman
-Concentration
élevée en NaCl :
Isolement sélectif
de
Staphylococcus
tolérant les fortes
concentrations en
NaCl.
50ml
37°C pendant 24
heures
- Colonies entourées
d’une zone jaune,
mannitol
+ : S. aureus,
S.saprophyticus…
- Colonies entourées
d’une zone rouge ou
pourpre, mannitol
 :
S. epidermidis,
S. hominis…
b. Recherche et dénombrement des bactéries anaérobies sulfito-réductrices :
Pour le dénombrement des spores des anaérobies sulfitoréducteurs, on utilise le milieu à base de viande- foie additionné d’une
ampoule d’Alun de Fer et une ampoule de Sulfite de Sodium par flacon de 250ml, les spores se manifest ent sous forme de colonies
entourées d’un halo noir. Le résultat s’exprime en nombre de spore par 100 ml (RODIER et al, 2005).
Les spores qui se sont développées en anaérobiose sont des bactéries produisant à partir des sulfites, des sulfures qui se pr écipitent
avec les ions de fer : Clostridium sulfitoréucteurs.