Chapitre II
Matériel et méthodes
2008-2009
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 L’échantillon peut être conservé plusieurs semaines.
Figure 11- Bac à ultra-son
2.3.2. Mode opératoire
 Mettre l’appareil (spectrophotomètre) en marche environ 30 minutes avant de
procéder aux dosages.
 Sortir l’échantillon du réfrigérateur ou du congélateur.
 Éviter d’exposer les échantillons à la lumière et procéder le plus rapidement possible
afin de minimiser la dégradation de la chlorophylle-a par la lumière et la chaleur.
L’échantillon est prêt pour passer au spectrophotomètre.
 Remplir la cuvette du spectrophotomètre avec environ 5 ml de l’échantillon et prendre
la lecture à 665 nm puis à 750 nm.
 Acidifier les échantillons avec 2 gouttes de HCl 2 N/10 ml et prendre de nouveau une
lecture après 1 minute.
2.3.3. La loi de Beer Lambert
La mesure de l’intensité de l’absorption dépend directement du nombre des particules
absorbant la lumière selon la loi de Beer Lambert selon laquelle l’absorbance est
proportionnelle ou coefficient d’absorption spécifique ε au trajet optique Let à la
concentration C.