Annexe :
D-2 : Mélange réactif :
Mélanger les réactifs ci-dessus dans les proportions suivantes :
• 100ml de solution de molybdate d’ammonium.
• 250ml d’acide sulfurique 2,5mol/l.
• 100ml de solution d’acide ascorbique.
• 50ml de solution d’oxytartrate de potassium et d’antimoine.
Solution étalon primaire de phosphate :
• Dissoudre 0,680g dans 1l d’eau distillée et ajouter 1ml de chloroforme. 1ml de PO
34
contient 5µmol de PO
34 . Donc la concentration de la solution est de 0,5 mol/l.
Solution étalon secondaire de phosphate :
• Diluer 100 fois la solution étalon primaire : 10ml complétés à 1000ml de l’eau
distillée avec 1ml de chloroforme.
D-3 : Mode opératoire :
On procédé comme suite :
• Préparer le mélange réactif.
• Mesurer 50ml d’échantillon.
• Ajouter 5ml du mélange réactif et homogénéiser.
• Atteindre 5 min et mesurer l’absorbance à 885nm.
D-4 : Etalonnage :
• Introduire, dans des fioles jugées de 500 ml, 5-10-20-60-80-100ml de solution étalon
secondaire et compléter à 500 ml avec de l’eau distillée pour obtenir la gamme de
concentration suivante : 0,5-1-2-6-8-10µmol/l.
• Retrancher des mesures d’absorbance la valeur obtenue avec l’eau distillée plus le
blanc des réactifs et tracer la courbe d’étalonnage.
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