Chapitre troisième
Matériel et méthodes
Evaluation de la contamination par les hydrocarbures
dans l’eau et le sédiment superficiel dans le port
d’Alger : cartographie des polluants
40
3.3.4. Analyse par spectrofluométrie ultraviolet (SFUV)
Nous avons choisi la SFUV, du fait de sa sensibilité, sa rapidité, sa globalité au niveau
des hydrocarbures polyaromatiques (HAP) et surtout parcequ’elle est peu sujette aux
interférences et fournit un excellent indice de pollution du milieu marin
La spectrofluométrie est une technique d’analyse appliquée et préconisée par la
Commission Océanographique Internationale de l’U.N.E.S.C.O (1977) pour la surveillance
de la pollution par les hydrocarbures en mer.
La limite de cette méthode est de l’ordre de 0,1 (µg/l) pou l’eau de mer (I.C.O, 1982)
3.3.4.1 Principe de la SFUV
Cette méthode permet de mesurer la fluorescence émise par des molécules soumises à
des rayonnements d’excitations ultraviolettes. Elle est très utilisée pour le dosage direct de
substances fort diverses comportant un noyau aromatique ou hétérocycle. De ce fait la
réponse de fluorescence fournit un bon indice de pollution pétrolière du fait de très faible
teneur des hydrocarbures aromatiques biogènes dans le milieu marin (Marchand, 1983).
3.3.4.2 Appareillage analytique
Nous avons utilisés pour cette analyse un spectrofluomètre de type HITACHI 650-10s
High sensitivity, équipé d’une lampe à xénon d’un balayage allant de 220 à 830 nm et de
cellules en quartz d’un centimètre de trajet optique, polies sur les quatre faces.
3.3.4.3 Etalonnage et gamme étalon
La standardisation de l’appareil nécessite un hydrocarbure de comparaison ou étalon
de référence. Celui préconisé est le chrysène ou 1,2 benzophenanthrène (C 18 H 12 ).
La gamme étalon se compose de 2 (mg) de chrysène dissous dans 10 (ml) d’hexane
soit de 10mg/50ml ou bien de 200µg/ml. Cette préparation est la solution mère ou solution
initiale.
Un volume de 1 (ml) est prélevé de cette dernière et dilué dans 25 (ml) d’eau distillée
afin d’obtenir une solution intermédiaire de 8 (µg/ml). A partir de cette seconde solution, des
dilutions sont réalisées pour aboutir aux cinq solutions filles ou gamme &talon présentées
dans le tableau suivant :
Tableau 04- Concentration des solutions filles en équivalant chrysène (C.O.I, 1984)
Etalons standards
S1
S2
S3
S4
S5
Concentration (µg/ml) 0.20
0.40
0.60
0.80
1.00
Matériel et méthodes
Evaluation de la contamination par les hydrocarbures
dans l’eau et le sédiment superficiel dans le port
d’Alger : cartographie des polluants
40
3.3.4. Analyse par spectrofluométrie ultraviolet (SFUV)
Nous avons choisi la SFUV, du fait de sa sensibilité, sa rapidité, sa globalité au niveau
des hydrocarbures polyaromatiques (HAP) et surtout parcequ’elle est peu sujette aux
interférences et fournit un excellent indice de pollution du milieu marin
La spectrofluométrie est une technique d’analyse appliquée et préconisée par la
Commission Océanographique Internationale de l’U.N.E.S.C.O (1977) pour la surveillance
de la pollution par les hydrocarbures en mer.
La limite de cette méthode est de l’ordre de 0,1 (µg/l) pou l’eau de mer (I.C.O, 1982)
3.3.4.1 Principe de la SFUV
Cette méthode permet de mesurer la fluorescence émise par des molécules soumises à
des rayonnements d’excitations ultraviolettes. Elle est très utilisée pour le dosage direct de
substances fort diverses comportant un noyau aromatique ou hétérocycle. De ce fait la
réponse de fluorescence fournit un bon indice de pollution pétrolière du fait de très faible
teneur des hydrocarbures aromatiques biogènes dans le milieu marin (Marchand, 1983).
3.3.4.2 Appareillage analytique
Nous avons utilisés pour cette analyse un spectrofluomètre de type HITACHI 650-10s
High sensitivity, équipé d’une lampe à xénon d’un balayage allant de 220 à 830 nm et de
cellules en quartz d’un centimètre de trajet optique, polies sur les quatre faces.
3.3.4.3 Etalonnage et gamme étalon
La standardisation de l’appareil nécessite un hydrocarbure de comparaison ou étalon
de référence. Celui préconisé est le chrysène ou 1,2 benzophenanthrène (C 18 H 12 ).
La gamme étalon se compose de 2 (mg) de chrysène dissous dans 10 (ml) d’hexane
soit de 10mg/50ml ou bien de 200µg/ml. Cette préparation est la solution mère ou solution
initiale.
Un volume de 1 (ml) est prélevé de cette dernière et dilué dans 25 (ml) d’eau distillée
afin d’obtenir une solution intermédiaire de 8 (µg/ml). A partir de cette seconde solution, des
dilutions sont réalisées pour aboutir aux cinq solutions filles ou gamme &talon présentées
dans le tableau suivant :
Tableau 04- Concentration des solutions filles en équivalant chrysène (C.O.I, 1984)
Etalons standards
S1
S2
S3
S4
S5
Concentration (µg/ml) 0.20
0.40
0.60
0.80
1.00