Chapitre IV : Matériels et Méthodes
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IV.3.4.1.4. Mesure des intensités de fluorescence
Les concentrations des hydrocarbures polyaromatiques sont déterminées à partir de courbe
étalon. Les conditions opératoires à la lecture des intensités de fluorescence (IF) sont les
suivantes :
 L’analyse de l’échantillon nécessite une longueur d’onde d’excitation 310 nm.
 L’émission de fluorescence est mesurée entre 310 et 500nm pour des longueurs
d’ondes d’émission fixées à 360 nm, 380nm et 410 nm avec un pic d’absorption
maximale à 360 nm pour les hydrocarbures aromatiques.
 Ouverture des fentes d’excitation et d’émission respectivement égale à 2 nm et 5 nm.
 plaçant une fraction de l’extrait dans une cuve en quartz de 1cm de trajet optique.
Les droites d’étalonnage ont la forme suivante :
IF : intensité de fluorescence en unité arbitraire U.A
C : concentration en hydrocarbures polyaromatiques HPA (en μg/ml)
a : pente de la droite
b : ordonnée à l’origine.
L’intensité de fluorescence (IF) est proportionnelle à la concentration (C) de l’échantillon
dans la gamme étalon, de réponse linéaire du spectrofluorimètre déterminée par la courbe
d’étalonnage.
IF = a C + b …………………. (1)