Matériel et Méthodes
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III.3.1.4. Mesure des intensités de fluorescence
Les concentrations des hydrocarbures polyaromatiques sont déterminées à partir de la
courbe d’étalonnage, La mesure se fait en plaçant une fraction de l’extrait purifié dans une
cuve en quartz de 1cm de trajet optique.
Les conditions opératoires à la lecture des intensités de fluorescence (IF) sont les conditions
suivantes :
Longueur d’onde d’excitation : 310 nm.
Longueur d’onde d’émission : 360 nm ; 380 nm ; 410 nm.
Les fentes d’excitation : 2 nm et celle d’émission : 5 nm.
L’intensité de fluorescence (IF) est proportionnelle à la concentration C de l’échantillon
dans la gamme d’étalon.
La droite d’étalonnage est représentée dans la Figure 3.15
Figure 3.15 : Droite d’étalonnage à 380 nm
III.3.1.5.Détermination
des
concentrations
en
hydrocarbures
polyaromatiques
Les concentrations des hydrocarbures polyaromatiques sont déterminées à partir de la
courbe d’étalonnage. L’intensité de fluorescence (IF) est proportionnelle à la concentration
[C] de l’échantillon dans la gamme étalon de réponse linéaire du spectrofluorimètre
déterminée par la courbe d’étalonnage.
Cette dernière est de la forme :
y = 34x + 1,46
R² = 0,9989
0
5
10
15
20
25
30
35
40
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1,2
Intensité
de
fluorescence
(IF)
[C] µg/ml
courbe d'étalonnage
IF = a C + b