Etude de l’eutrophisation et du système des carbonates dans la baie de Bou-Ismail en Printemps 2015
Matériels et méthodes
40
3.5.6
Chlorophylle a
La chlorophylle a est le pigment photosynthétique principal du phytoplancton. La mesure de
sa concentration est utilisée pour l’estimation de la production primaire.
La mesure des pigments phytoplanctoniques repose sur leurs caractéristiques
spectroscopiques : absorption de lumière (spectrophotométrie) ou fluorescence (fluorimétrie).
La mesure de la chlorophylle a au laboratoire a été effectuée par la méthode fluorimétrique
selon le protocole proposé par Aminot et Kérouel (2004).
3.5.6.1
Principe de mesure
La chlorophylle a est un paramètre « particulaire » qui, pour une mesure précise en
laboratoire, nécessite la récolte du matériel en suspension par filtration, suivie d'une extraction
du filtre par un solvant.
La méthode fluorimétrique classique pour la mesure de la chlorophylle a repose sur la mesure
de la fluorescence de l’extrait à une longueur d’onde unique avant et après acidification.
Avec ces données, les concentrations en chlorophylle a et en phéopigments a sont calculées
en appliquant les équations proposées par Holm-Hansen et al. (1965).
La fluorimétrie est au moins d'un ordre de grandeur plus sensible que la spectrophotométrie.
Ceci rend la fluorimétrie plus attractive dans le cas des zones oligotrophes (en évitant de
filtrer des volumes élevés) et indispensable lorsque l'on ne dispose que de petits échantillons
ne permettant pas d'obtenir des absorbances suffisamment élevées.
3.5.6.2
Prélèvement
L’échantillonnage de la chlorophylle a s’est fait en dernier, dans des bouteilles en plastiques
d’1,5 L. En effet, le volume d’échantillon doit être déterminé en fonction de la richesse en
phytoplancton, de la précision souhaitée ainsi que de la méthode de mesure (100ml à 2 litres
dans le domaine côtier).
Après le prélèvement, les échantillons sont placés à l’abri de la lumière.
3.5.6.3
Analyse au laboratoire
L’analyse de la chlorophylle nécessite une protection permanente contre la lumière à toutes
les étapes du protocole analytique, car ces pigments sont photosensibles.
La filtration des échantillons de chlorophylles « a » a été effectuée le jour de la sortie au
laboratoire. La procédure de filtration et le mode de dosage sont décrits en annexe (06).
La concentration de la chlorophylle « a » et des phéopigments « a » est donnée par les
équations suivantes :
[í µí°¶ℎí µí±í µí±í µí±í µí±í µí±ℎí µí±¦í µí±í µí±í µí± í µí± ](µí µí± í µí±
⁄ ) = í µí°¾ ×
í µí± max
(í µí± max−1)
× (í µí°¹ í µí±í µí°´ − í µí°¹
í µí°´ ) ×
í µí±£
1000×í µí±
…(37)
Matériels et méthodes
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Chlorophylle a
La chlorophylle a est le pigment photosynthétique principal du phytoplancton. La mesure de
sa concentration est utilisée pour l’estimation de la production primaire.
La mesure des pigments phytoplanctoniques repose sur leurs caractéristiques
spectroscopiques : absorption de lumière (spectrophotométrie) ou fluorescence (fluorimétrie).
La mesure de la chlorophylle a au laboratoire a été effectuée par la méthode fluorimétrique
selon le protocole proposé par Aminot et Kérouel (2004).
3.5.6.1
Principe de mesure
La chlorophylle a est un paramètre « particulaire » qui, pour une mesure précise en
laboratoire, nécessite la récolte du matériel en suspension par filtration, suivie d'une extraction
du filtre par un solvant.
La méthode fluorimétrique classique pour la mesure de la chlorophylle a repose sur la mesure
de la fluorescence de l’extrait à une longueur d’onde unique avant et après acidification.
Avec ces données, les concentrations en chlorophylle a et en phéopigments a sont calculées
en appliquant les équations proposées par Holm-Hansen et al. (1965).
La fluorimétrie est au moins d'un ordre de grandeur plus sensible que la spectrophotométrie.
Ceci rend la fluorimétrie plus attractive dans le cas des zones oligotrophes (en évitant de
filtrer des volumes élevés) et indispensable lorsque l'on ne dispose que de petits échantillons
ne permettant pas d'obtenir des absorbances suffisamment élevées.
3.5.6.2
Prélèvement
L’échantillonnage de la chlorophylle a s’est fait en dernier, dans des bouteilles en plastiques
d’1,5 L. En effet, le volume d’échantillon doit être déterminé en fonction de la richesse en
phytoplancton, de la précision souhaitée ainsi que de la méthode de mesure (100ml à 2 litres
dans le domaine côtier).
Après le prélèvement, les échantillons sont placés à l’abri de la lumière.
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Analyse au laboratoire
L’analyse de la chlorophylle nécessite une protection permanente contre la lumière à toutes
les étapes du protocole analytique, car ces pigments sont photosensibles.
La filtration des échantillons de chlorophylles « a » a été effectuée le jour de la sortie au
laboratoire. La procédure de filtration et le mode de dosage sont décrits en annexe (06).
La concentration de la chlorophylle « a » et des phéopigments « a » est donnée par les
équations suivantes :
[í µí°¶ℎí µí±í µí±í µí±í µí±í µí±ℎí µí±¦í µí±í µí±í µí± í µí± ](µí µí± í µí±
⁄ ) = í µí°¾ ×
í µí± max
(í µí± max−1)
× (í µí°¹ í µí±í µí°´ − í µí°¹
í µí°´ ) ×
í µí±£
1000×í µí±
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