Chapitre 3
Matériel et Méthode
52
- Des micropipettes Fortuna ® avec éjecteur d’embouts de type DIGITAL, une de
200 à 1000 μl et l’autre de 20 à 250 μl, ainsi que des fioles de 100 et 500 ml ;
- Balance, Spatule, entonnoir, bécher et la hôte.
3.1.7.2.2.3 Analyse automatique des sels nutritifs
Les réactifs, les solutions étalons, et les protocoles de dosage pour chaque élément nutritif
sont réalisés selon les protocoles décrits par (Aminot et al.,1983).
Principe de dosage des Nitrates et Nitrites (NO 3
- et NO 2
-
)
La méthode est basée sur la réduction des nitrates en nitrites par passage de l’échantillon
sur une colonne de cadmium traité au cuivre (Wood et al. 1967, in Aminot et Kérouel,
2004). Après cette réduction les nitrites sont dosés selon les conditions réactionnelles
décrites par Bendshneider et Robinson (1952) (in Aminot et Kérouel 2004). Cette
méthode automatisée s'applique à des concentrations allant de 1 à 100 ppb de N. En effet,
les nitrites forment un diazoïque par réaction avec la sulfanilamide en milieu acide (pH <
2). Ce composé formera ensuite, en présence de N-naphtylethylene diamine, un composé
azoïque de couleur rosée absorbant un maximum de lumière à 540 nm (SKALAR®,1998).
Principe du dosage des Orthophosphates (PO4
-3 )
Sa méthode d’analyse est la colorimétrie du bleu phosphomolybdique, qui est basée sur la
réaction de Deniges selon la méthode de Murphy & Reily (1962) (in Aminot et Kérouel,
2004).
Le molybdate d'ammonium et le tartrate d'antimoine de potassium réagissent à une
température de 40°C dans un milieu acide avec les solutions diluées du phosphate pour
former un composé d'antimoine-phospho-molybdate. Ce composé est réduit à un composé
intensément bleu-coloré par l'acide ascorbique à un maximum d’absorption à 880nm
Principe du dosage des silicates (SiO2-)
Le dosage de l'acide orthosilicique dans l'eau de mer est basé sur la méthode de Mulin et
Reily (l955). Cette méthode a été adaptée à l'analyse automatisée et nous avons utilisé la
technique du constructeur SKALAR. Cette dernière repose sur la formation de l'acide
silicomolybdique, non affectée par la salinité proposée par Smith et Milne (1981) (in
Aminot et Kérouel, 2004). Sa mesure est basée sur la formation d’un complexe
silicomolybdique par la réaction des silicates avec le molybdates d’ammonium en milieu
Matériel et Méthode
52
- Des micropipettes Fortuna ® avec éjecteur d’embouts de type DIGITAL, une de
200 à 1000 μl et l’autre de 20 à 250 μl, ainsi que des fioles de 100 et 500 ml ;
- Balance, Spatule, entonnoir, bécher et la hôte.
3.1.7.2.2.3 Analyse automatique des sels nutritifs
Les réactifs, les solutions étalons, et les protocoles de dosage pour chaque élément nutritif
sont réalisés selon les protocoles décrits par (Aminot et al.,1983).
Principe de dosage des Nitrates et Nitrites (NO 3
- et NO 2
-
)
La méthode est basée sur la réduction des nitrates en nitrites par passage de l’échantillon
sur une colonne de cadmium traité au cuivre (Wood et al. 1967, in Aminot et Kérouel,
2004). Après cette réduction les nitrites sont dosés selon les conditions réactionnelles
décrites par Bendshneider et Robinson (1952) (in Aminot et Kérouel 2004). Cette
méthode automatisée s'applique à des concentrations allant de 1 à 100 ppb de N. En effet,
les nitrites forment un diazoïque par réaction avec la sulfanilamide en milieu acide (pH <
2). Ce composé formera ensuite, en présence de N-naphtylethylene diamine, un composé
azoïque de couleur rosée absorbant un maximum de lumière à 540 nm (SKALAR®,1998).
Principe du dosage des Orthophosphates (PO4
-3 )
Sa méthode d’analyse est la colorimétrie du bleu phosphomolybdique, qui est basée sur la
réaction de Deniges selon la méthode de Murphy & Reily (1962) (in Aminot et Kérouel,
2004).
Le molybdate d'ammonium et le tartrate d'antimoine de potassium réagissent à une
température de 40°C dans un milieu acide avec les solutions diluées du phosphate pour
former un composé d'antimoine-phospho-molybdate. Ce composé est réduit à un composé
intensément bleu-coloré par l'acide ascorbique à un maximum d’absorption à 880nm
Principe du dosage des silicates (SiO2-)
Le dosage de l'acide orthosilicique dans l'eau de mer est basé sur la méthode de Mulin et
Reily (l955). Cette méthode a été adaptée à l'analyse automatisée et nous avons utilisé la
technique du constructeur SKALAR. Cette dernière repose sur la formation de l'acide
silicomolybdique, non affectée par la salinité proposée par Smith et Milne (1981) (in
Aminot et Kérouel, 2004). Sa mesure est basée sur la formation d’un complexe
silicomolybdique par la réaction des silicates avec le molybdates d’ammonium en milieu