Chapitre II : Méthode d’identification
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L'application de l'électrolocalisation à la séparation des protéines du muscle de
poissondevrait permettre de résoudre plus facilement les problèmes d'identifications et plus
particulièrement ceux que posent encore certaines espèces très voisines qui présentent des
différences n'apparaissant que difficilement par les procédés habituels d'électrophorèse
(Morel, 1974).
Electrophorèse de protéines sur gel de polyacrylamide en présence de
dodécyl sulfate de sodium (SDS-PAGE)
Une autre technique de séparation des protéines est la très populaire SDS-PAGE pour
« Sodium Dodecyl Sulfate - Poly Acrylamide Gel Electrophoresis » décrite initialement par
Laemmli en 1970, et aujourd’hui très largement répandue. C’est une électrophorèse de zone
des protéines dans un gel de polyacrylamide en conditions dénaturantes (Ballihaut, 2007).
Le sodium dodecyl sulfate (SDS), une fois fixé sur les protéines, ils seront chargés
négativement ,alors la migration se fait selon le poids moléculaire.
Figure7 : Principe de l’électrophorèse monodimensionnelle sur gel de polyacrylamide en
condition dénaturantes (1D-SDS-PAGE)(Ballihaut ,2007).
Limites
Cependant, les limites à l’utilisation de l’électrophorèse sont, en plus de la limitation
du polymorphisme observé, le cryptage de certaines mutations que peuvent affecter l’Afait de
la redondance du code génétique. On considère que les deux tiers des mutations sont
cryptiques, ce qui sous estime la variabilité génétique des organismes (Protz, 1983).
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L'application de l'électrolocalisation à la séparation des protéines du muscle de
poissondevrait permettre de résoudre plus facilement les problèmes d'identifications et plus
particulièrement ceux que posent encore certaines espèces très voisines qui présentent des
différences n'apparaissant que difficilement par les procédés habituels d'électrophorèse
(Morel, 1974).
Electrophorèse de protéines sur gel de polyacrylamide en présence de
dodécyl sulfate de sodium (SDS-PAGE)
Une autre technique de séparation des protéines est la très populaire SDS-PAGE pour
« Sodium Dodecyl Sulfate - Poly Acrylamide Gel Electrophoresis » décrite initialement par
Laemmli en 1970, et aujourd’hui très largement répandue. C’est une électrophorèse de zone
des protéines dans un gel de polyacrylamide en conditions dénaturantes (Ballihaut, 2007).
Le sodium dodecyl sulfate (SDS), une fois fixé sur les protéines, ils seront chargés
négativement ,alors la migration se fait selon le poids moléculaire.
Figure7 : Principe de l’électrophorèse monodimensionnelle sur gel de polyacrylamide en
condition dénaturantes (1D-SDS-PAGE)(Ballihaut ,2007).
Limites
Cependant, les limites à l’utilisation de l’électrophorèse sont, en plus de la limitation
du polymorphisme observé, le cryptage de certaines mutations que peuvent affecter l’Afait de
la redondance du code génétique. On considère que les deux tiers des mutations sont
cryptiques, ce qui sous estime la variabilité génétique des organismes (Protz, 1983).